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目的:建立发热家兔模型,观察热必清颗粒对LPS诱导发热家兔的退热作用,从分子水平研究对于血清中CRP、PCT及肠道双歧杆菌数量的影响,进一步揭示热必清颗粒对发热家兔的解热作用机制及药物对肠道菌群的影响,从而为在临床上广泛应用热必清颗粒治疗小儿发热提供可靠的实验依据,及最有效的治疗手段。 方法: 1.采用大肠杆菌内毒素(LPS)诱导家兔发热,制作发热模型。 2.选取50天左右的35只幼兔,体重约在(2000±20)g,雌雄不拘,于实验动物中心适应性喂养7天,每天测定其基础体温,待体温稳定后正式实验。将35只家兔随机分为:A.空白组B.模型组C.热必清小剂量组 D.热必清中剂量组;E.热必清大剂量组。 3.造模成功后:A:空白组:不作任何处理,常规饲养;B:模型组:生理盐水(10ml/kg)灌胃;C:热必清小剂量组:热必清颗粒4.618g/kg灌胃;D:热必清中剂量组:热必清颗粒9.327g/kg灌胃;E:热必清大剂量组:热必清颗粒12.932g/kg灌胃。 4.给药后连续监测家兔体温,每隔30min记录各组家兔的体温变化情况,共6小时;并绘制平均体温曲线图,及△T(基础体温与发热高峰的差值)曲线图,并取相关标本进行测定。 5.运用ELISA(酶联免疫吸附法)法检测各组家兔血清中CRP、PCT的含量; 6.通过BBL培养基培养家兔粪便中双歧杆菌,通过镜检观察数量的变化。 结果: 1.热必清颗粒对发热家兔一般状态的影响:造模后:与空白组对比,各组家兔均出现体温升高,发抖、蜷缩、呼吸急促、精神萎靡、寒战;给药治疗后,与模型组相比,其余各组的上述症状明显改善,且大、中剂量组最为明显,提示热必清颗粒对于降低发热家兔体温,及改善症状效果明显。 2.热必清颗粒各治疗组均能改善发热家兔的一般精神状态,降低发热体温,与模型组相比,具有统计学意义(P<0.05),说明热必清颗粒对发热家兔有解热作用,且与灌胃剂量的增加呈依赖性。 3.热必清颗粒各治疗组对于发热家兔血清中CRP、PCT的值,与模型组家兔对比,均能下降,具有明显差异(P<0.05);实验D、E组与C组相比,具有统计学意义(P<0.01);与空白组相比,无明显差异(P>0.05);而C组与B组相比有差异P<0.05;D组与E组相比,未见明显差异(P>0.05)。 4.给药前各组家兔双歧杆菌数量无显著变化(P>0.05),给药后E组与A、B、C、D组比较及E组给药前后对比均出现数量显著降低(P<0.05)。 结论: 1.采用耳缘静脉注射LPS可成功制备发热家兔模型。 2.造模后家兔会出现普遍发热,体温较基础体温0.3℃及以上,并且出现发抖、蜷缩、呼吸急促、精神萎靡、寒战等症状。以上部分表现类似于临床发热患儿的症状及病理改变,经热必清颗粒灌胃治疗后上症均有所改善。 3.热必清颗粒可以抑制家兔血清中CRP、PCT含量的表达,引起发热家兔的体温下降,可能是热必清颗粒解热作用机制之一。 4.热必清颗粒随着药物剂量加大,会抑制肠道双歧杆菌的生长,造成肠道菌群紊乱。 5.热必清颗粒中剂量组能明显降低发热家兔的体温,且持续时间长,又不会对肠道有益菌造成影响,可以作为最佳用药剂量。