【摘 要】
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该文以本室保藏的20多株特异苏云金芽孢杆菌为试材,验证了部分菌株的H-血清型,研究确定了来自Bt商品制剂Centari菌粉的菌株9510属于血清型H,科墨尔亚种(Bt subsp.colmeri).22
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该文以本室保藏的20多株特异苏云金芽孢杆菌为试材,验证了部分菌株的H-血清型,研究确定了来自Bt商品制剂Centari菌粉的菌株9510属于血清型H<,21>,科墨尔亚种(Bt subsp.colmeri).22株特异Bt菌株伴孢晶体形态观察显示,不同菌株晶体形态各不相同,主要包括:菱形(双金字塔形)、球形、方形、长方形、椭圆形、镶嵌型、小点形及不规则形等八种形态.大多数菌株具有两种形态以上的晶体.使用cry1,cry2cry3,cry4/11,cry9及cyt等基因的通用引物,以及cry1AC,cry1B,cry1C,cry1E,cry1I,cry9A-E及vip3A等基因的特异引物,对22株Bt特异菌株的cry基因型进行了PCR检测.利用SDS-PAGE,对18株特异Bt菌株的蛋白图谱进行了分析.以棉铃虫和甜菜夜蛾为供试虫种,对22株Bt特异菌株进行了生物活性初筛,并在此基础上测定了对棉铃虫和甜菜夜蛾高毒菌株的杀虫毒力(LC50).对含有cry9基因的4株菌株,9510,HD-133,95125-4及15A3进行PCR-RFLP检测分析,于菌株95125-4中发现一个潜在的新基因.对此新基因C-端1.7kb PCR产物进行克隆,序列测定结果表明此片断大小为1739bp,通过与GenBank中所有核苷酸序列的比较发现,它与已知的cry9Eb基因对应的C-端序列同源性最高,为96﹪;氨基酸序列的比较表明它与Cry9Eb蛋白C-端序列的同源性为95﹪.以上结果表明该基因是一个潜在的新cry9基因,其C-端片断已可向GenBank申请序列号.但是此新基因在cry基因分类系统中的命名须要确定其全长序列,其N-端片断的克隆、测序工作正在进行.
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