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WT1蛋白高表达在各型白血病及80%以上实体瘤。WT1高表达与细胞恶性转变或恶性细胞大量增殖的一致性、WT1表达水平与白血病疗效预后的负相关性以及反义寡核苷酸抑制WT1表达则癌细胞生长停止的事实说明WT1是癌细胞维持其恶性增殖所必需,癌细胞不可能通过下调WT1的表达来逃避针对WT1的免疫治疗,所以WT1肽是广谱性免疫治疗恶性肿瘤的优选靶抗原。目前国内尚未见WT1肽免疫治疗恶性肿瘤的研究报道,国外已经通过了体外、小鼠体内抗瘤效应、临床一期试验,并已经取得一定疗效。但临床试验有效率仅60%,部分病人无任何疗效甚至肿瘤持续增长。所以将WT1肽疫苗成功地用于恶性肿瘤的治疗或预防,仍然需要解决许多问题。分析国外研究发现特异CTL体外溶解靶细胞存在交叉性,即某WT1肽特异CTL溶解某种瘤细胞,不溶解另一种瘤细胞,而另一种WT1肽特异CTL可溶解后一种瘤细胞,而不溶解前一种。据此可以推测:虽然瘤细胞高表达WT1,并且此WT1蛋白的抗原决定基(AD)能被与CTL表面相同的HLA-I类分子提呈到瘤细胞表面,但此HLA-I类分子可提呈的是具有某相同锚定残基的一类型WT1肽性质的AD,而不是某个固定WT1肽,所以WT1肽疫苗特异CTL未必能在瘤细胞表面识别结合到足够量的相应AD以杀伤瘤细胞。如果用多种WT1肽疫苗联合免疫,不仅可使特异CTL捕捉到瘤细胞表面特异AD的几率升高,而且可防止疫苗重复应用中瘤细胞表面优势表达的WT1 AD调变而导致的免疫逃逸。从理论上讲,如果一种肽免疫的群体中的有效率为60% ,两种肽免疫将使有效率达84%〔60%+(100%-60%)×60%〕,三种肽将达93.6%〔84%+(100%-84%)×60%〕。所以,多个WT1肽疫苗联合应用理论上能提高疫苗在群体中有效率。但因为小分子的肽疫苗作为激发免疫的AD,需要先结合到APC表面HLA-I类分子上,才能被CTL前体识别,进而激活特异CTL。多个具有同样HLA-I类分子锚定位点的肽疫苗联合应用可能互相竞争结合HLA-I类分子,也可能互相协作、辅助对方结合I类分子,也可能互不相关,从而可能导致群体中有效率提高而个体内疗效下降的结果。Azuma T等用两种WT1肽特异CTL与两种CTL各一半混合而成的CTL,比较3组之间杀伤WT1(+)瘤细胞效应,发现后者并不比前两组杀伤率高,从而认为两种肽疫苗无协同效应、没必要设计针对同一靶抗原上不同AD的疫苗。本研究认为,两种AD共同免疫时,各自刺激免疫系统产生的CTL未必是各自单独免疫时的一半,所以,其实验方法不能明确两种肽疫苗有无协同效应。目前,除了Azuma T体外研究两种CTL联合杀伤靶细胞外,国内外均未见有研究两种以上WT1联合肽疫苗抗瘤效应的报道。本课题针对中国乃至亚洲HLA-A基因频率最高的HLA-A*0201人群,用两种均已在人