脂肪组织对机体能量代谢和平衡具有重要作用,同时对动物的肉质产生很大影响。牛肉的嫩度、风味和多汁性主要受肌内脂肪含量的影响。脂肪细胞是由前体脂肪细胞分化而来的,此过程受激素和生长因子的调控,这些激素或生长因子的改变会影响前体脂肪细胞的分化。研究表明,ADAMTS2基因是原胶原转变成胶原过程的剪切酶,它通过对胶原蛋白的生物合成调控脂质的沉积。ADAMTS4基因是牛肉形成大理石纹状的重要基因之一。由于ADAMTS2和ADAMTS4基因都能对脂肪生成进行调控,从而推测ADAMTS2和ADAMTS4基因的表达与前体脂肪细胞分化和肌肉内脂肪的沉积有关。因此,本文以牛前体脂肪细胞为研究对象,分析ADAMTS2或ADAMTS4基因对脂质沉积的影响,来获得ADAMTS2和ADAMTS4基因在牛前体脂肪细胞分化过程中的作用。本研究首先采取犊牛皮下脂肪组织进行体外分离和培养。其次将合成的siRNA通过lipo-2000转染至前体脂肪细胞中,特异性敲减ADAMTS2和ADAMTS4基因的表达,通过q RT-PCR方法检测与脂肪细胞分化相关基因mRNA表达量变化情况,用胰岛素等对转染后的细胞进行诱导,通过HE染色、MASSON染色和扫描电镜方法检测脂质沉积情况,Western-Blot来检测转染后蛋白表达情况。结果表明,敲减ADAMTS2基因后,与脂肪细胞分化相关基因PPAR、DGAT2、COL1A1、COL3A1、ADAMTS2、ADAMTS4和Aggrecan的mRNA表达量均降低,而与脂肪细胞分化相关基因EBP和COL2A1的mRNA表达量无明显变化。敲减ADAMTS4基因后,与脂肪细胞分化相关基因PPAR、DGAT2、COL3A1、ADAMTS2、ADAMTS4和Aggrecan的mRNA表达量均降低,而与脂肪细胞分化相关基因COL1A1、EBP和COL2A1基因m RNA表达量无明显变化。敲减ADAMTS2或ADAMTS4基因并经过诱导后,实验组脂质量明显比对照组少。Western-Blot分析表明,ADAMTS2和ADAMTS4蛋白在siRNA转染后,蛋白表达量均降低。说明ADAMTS2和ADAMTS4基因均与脂肪细胞分化相关,二者对前体脂肪细胞分化作用机制不同,本研究从形态学和分子调控机制方面对ADAMTS2和ADAMTS4基因在牛前体脂肪细胞分化中的作用进行了分析,这有助于揭示脂肪分化的分子机制,为提高牛肉品质及良种选育提供理论依据。