PI3K/Akt信号通路在大鼠过度训练致急性肾损伤中的作用及山莨菪碱的干预效应

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背景与目的过度训练是一种涉及多器官功能障碍的病理状态,是由明显超过人体的承受能力的高负荷训练所导致的。由于目前我军官兵在军事训练中仍然存在方法不科学,片面追求运动量等现象,故过度训练是较常见的运动性疾病。肾脏对血液灌注的需求较高,缺血缺氧状态下较易受到损伤。在过度训练的条件下,血液向肌肉、肺、心脏分配增加,肾血流量下降明显,容易造成缺血缺氧损伤。目前过度训练致急性肾损伤(OTIAKI)发病率呈逐年增长,致死率、致残率较高,且尚无特效的药物治疗手段。山莨菪碱具有外周抗胆碱的作用,是从植物唐古特山莨菪中提取而成。本课题组既往研究表明,山莨菪碱干预可以有效减轻急性肾损伤,但具体机制尚未完全阐明。磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/丝氨酸-苏氨酸激酶(Akt)通路是一种作用广泛的信号转导通路,与真核细胞的凋亡、增殖、分化等多种生命活动有关。近年来发现PI3K/Akt通路与多种急性肾脏疾病关系密切,提示此通路也可能参与0TIAKI的病理变化。本研究通过游泳力竭运动建立大鼠过度训练模型,使用山莨菪碱和PI3K抑制剂渥曼青霉素进行干预,探讨PI3K/Akt信号通路在过度训练致急性肾损伤中的作用和机制,以及山莨菪碱是否通过PI3K/Akt信号通路起到肾脏保护作用。方法将60只大鼠随机分为4组:正常对照组(NC)、过度训练组(0T)、过度训练+山莨菪碱组(OTA)、过度训练+渥曼青霉素组(OTW)。除NC组外,其余各组分为建模后即刻、6h和24h三个亚组。通过一次性游泳力竭运动建立过度训练模型。0TW和0TA组于建模前20分钟分别腹腔注射渥曼青霉素25 μl/kg和山莨菪碱10mg/kg。于相应时点检测血清肌酐、尿素氮和肌酸激酶水平;HE染色法观察肾脏病理变化;Western blot法检测肾组织Akt、p-Akt、Nrf2蛋白表达;TUNEL法检测肾脏细胞凋亡。结果与NC组相比,0T组出现肾功能障碍、肾病理损伤和细胞凋亡,p-Akt、Nrf2蛋白表达上调(p<0.05)。与0T组相比,OTA组部分时点肾功能障碍和病理损伤减轻,细胞凋亡减少,p-Akt、Nrf2表达进一步上调(p<0.05)。与0T组相比,0TW组结果趋势与0TA组相反,部分时点肾功能障碍和病理损伤加重,细胞凋亡增多,p-Akt、Nrf2表达受到抑制(p<0.05)。各组间Akt表达无明显差异。结论在过度训练致急性肾损伤中,PI3K/Akt通路激活增多,进而上调Nrf2表达,减少过氧化反应,改善肾功能,减轻肾脏病理损伤,抑制细胞凋亡。山莨菪碱可通过该通路发挥肾脏保护作用。
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