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酶法提取皮胶原蛋白具有重大的经济价值和环保意义。本论文以新鲜猪皮或制革过程中产生的原皮下脚料为原料,采用了一步法、两步法(抑活)和两步法(不抑活)三种工艺,系统地研究了166酶和AS1.398酶的酶用量、酶作用时间和温度、热溶解时间和温度等条件对皮溶解率、水解产物分子量分布和粘度的影响。实验结果表明,与碱法明胶不同,酶解猪皮水解产物分子量是不连续分布的,有利于开发高附加值的产品;两步法(抑活)工艺水解产物分子平均分子量远大于碱法明胶的平均分子量,主要集中在大于97KD分子量段,而两步法(不抑活)工艺容易得到平均分子量小于碱法明胶的水解产物;实验条件范围内,胶原提取工艺对水解产物分子量的影响大于酶用量等具体实验条件。 为了给两步法(抑活)胶原提取工艺提供基础,在论文的开始研究了猪皮中残存166酶、AS1.398酶活力酸性抑制的方法。结果发现,166酶比AS1.398酶具有更强的耐酸性,用含8%NaCl的0.1N盐酸(pH值2.0的0.2MNa2HPO4-柠檬酸缓冲溶液)两次处理残存有166酶(AS1.398酶)的皮块,可以完全抑 四川人学硕士学位论文制皮内的活力。 在论文的最后,初步探讨了除去酶解胶原产物中杂蛋白的方法。研究表明,用 DEAE-纤维素阴离于交换剂作填料,pH值 7.5的 0刀SM TriS用 缓冲溶液作样品和洗脱缓冲溶液,逐渐增加洗脱液NaCI的浓度,可以除去水解胶原中的杂蛋白。