舒林酸经survivin/Aurora B/Op18途径对人胰腺癌细胞增殖的阻断效应

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目的:近年来常有报道非甾体类抗炎药(NSAIDs)对多种常见肿瘤细胞都有明显抑制作用,但对于其作用机制尚不清楚。survivin和Aurora B都是染色体过客复合物的成员,在染色体排列、纺锤体形成及其后的胞质分裂中都起着关键作用,两者之间也存在互相激活的关系,破坏两者两者联系可妨碍CPC在细胞分裂中功能的发挥。Op18是首先在白血病细胞被发现的一种保守的磷蛋白,与微管蛋白二聚体结合后促进其解聚,从而参与调节有丝分裂时的微管动力。它的磷酸化受Aurora B的调节,可以作为Aurora B活性的标志。本实验观察舒林酸对胰腺癌细胞BXPC-3作用前后survivin, Aurora B和Op18在mRNA和蛋白质水平或磷酸化水平的表达差异及其对细胞周期和增殖的影响,分析舒林酸与survivin, Aurora B和Op18之间存在的关系,初步确定舒林酸可否通过该途径影响胰腺癌细胞的增殖。方法:应用MTT比色法确定舒林酸对BXPC-3细胞的增殖抑制作用;RT-PCR法检测不同浓度舒林酸对胰腺癌BXPC-3细胞株survivin, Aurora B和Op18 mRNA表达量的影响;用western blot法检测其对survivin蛋白,Pho-Aurora B Thr-232和Pho-Op18 Ser-16表达量的影响;流式细胞仪检测细胞周期变化。结果:舒林酸可明显抑制BXPC-3细胞增殖,并具有时间和剂量依赖性;经500μmol/L舒林酸作用48h后,survivin, Aurora B和Op18 mRNA的表达均有显著下调;survivin蛋白表达也显著下调,Pho-Aurora B Thr-232和Pho-Op18 Ser-16磷酸化水平显著下降;使G0/G1期细胞比例增高,达(70.58±3.21)%,S期比例降低为(14.73±2.10)%。结论:舒林酸可抑制胰腺癌细胞BXPC-3的增殖,其可能机制是舒林酸下调survivin表达,降低Aurora B和Op18的活性,从而影响染色体过客复合物蛋白(CPC)对细胞染色体的排列和胞质分离作用,使大量细胞停滞在G0/ G1期,从而抑制细胞增殖。
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