三叶木通(Akebia trifoliate(Thunb.)Koidz),别名八月瓜、八月札、八月楂、牛腰子等,为木通科木通属木质藤本,以其果实可入药,收载于2015版中国药典。其果实亦可作为鲜实水果,具有香味浓厚、酸甜适中、风味独特等区域特色,但由于果皮厚、果实开裂、籽多,一定程度上限制了其广泛推广。乙烯在果实发育和开裂中发挥着重要作用,为明确和清晰乙烯在三叶木通果实发育中的调控作用奠定基础,本研究的主要内容有:1.以三叶木通果实6个不同生长发育时期的总RNA,利用Illumina HiSeq2000技术平台进行转录组测序,拼接获得三叶木通果实发育相关的Unigene 106547条,基因功能注释成功的Unigene 39501条,在GO与KOG数据库中分别有27302和12014条Unigene注释成功,KEGG通路分析显示有11749个Unigene参与270条代谢通路中。2.对三叶木通果实生长变化规律进行了研究,结果显示,三叶木通果实在挂果后1-42 d内果径增速较快,在42 d之后变慢;挂果后1-35 d内果长增速较快,在35 d之后变慢。初步分析认为,三叶木通果实自挂果后1-42 d为生长迅速期,之后进入生长缓慢期;参照熊大胜对果实发育期的描述,将Sample 1定为受精结实期、Sample 2为速生期、Sample 3为缓生期、Sample 4和Sample 5为充实期、Sample 6为熟前生长期。3.由于国内外文献缺乏对三叶木通果实发育的研究,内参基因的选择是开展果实发育中基因表达的基础,本研究选择22候选内参基因,以geNorm、Normfinder、bestkeeper三个内参基因分析软件对其稳定性值、稳定值、标准变异系数等进行了分析,结果表明:RG19(histone h3)与RG5(EF-α)基因具有稳定高、果实发育期变异小等优点,RG19(histone h3)与RG5(EF-α)配合使用适于三叶木通果实发育的研究。4.基于转录组数据筛选出13条目的基因,根据其CDS序列设计引物,进行常规PCR试验并测序。序列与Unigenes对比结果表明相似度高。对目的基因进行实时荧光定量PCR试验,试验结果与转录组测序数据结果完全一致。5.基于转录组测序结果,对13条乙烯合成相关基因表达量变化情况进行分析,结果显示,随着果实的成熟,编码甲硫氨酸腺苷转移酶的基因与编码ACC表达量明显升高。高效液相色谱测量结果显示,ACC含量与编码ACC氧化酶的基因的表达量相关性更大。