棉花GhPAO3基因抗旱功能初步分析

来源 :石河子大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:y5603179
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:新疆作为我国棉花主产区,对我国棉花产业有着举足轻重的影响。作为一个干旱缺水的地区,新疆的棉花在生长发育过程中极易受到干旱胁迫的影响,减少棉花产量及降低棉花品质。多胺被誉为第六大植物激素,在植物生长发育及逆境胁迫中有着重要作用,所以,探究多胺在棉花抵御干旱胁迫中的生物学功能具有重要意义。多胺氧化酶作为氧化分解多胺的一种重要的酶,控制调节植物体内多胺的动态平衡,能够在植物感知外界信号后迅速改变植物体内各种多胺的含量,来响应植物感知的信号。本研究将构建好的棉花GhPAO3基因过表达载体转化模式植物拟南芥,筛选出纯合转基因拟南芥株系作为实验材料,模拟干旱条件下种子的萌发及生长状态观测,初步分析棉花GhPAO3基因在抗旱方面的功能,为棉花在抗旱分子育种及棉花多胺氧化酶功能研究方面提供一定的基础。
  方法:本研究通过农杆菌转化法得到转基因拟南芥。利用纯合体拟南芥观察模拟干旱条件下的种子的萌发与植株生长状态,鉴定该基因在植物响应干旱胁迫时的功能;利用基因编辑技术,构建敲除GhPAO3基因的编辑载体,以期后续实验能验证该基因在棉花抵御干旱胁迫时的具体作用。
  结果:(1)通过农杆菌转化获得转棉花GhPAO3基因的拟南芥,筛选出纯合体后测定多胺含量,结果表明该基因合成的多胺氧化酶是以精胺为反应底物。
  (2)对三种材料拟南芥种子进行干旱处理,统计发芽势。实验结果表明在转入了GhPAO3基因后,提高了拟南芥种子在干旱条件下的发芽率。
  (3)对三种材料拟南芥幼苗进行干旱处理,测定过氧化氢、内源多胺含量及抗旱相关标志基因的表达量,结果表明GhPAO3基因转入拟南芥后,降低了拟南芥幼苗抗旱能力,表明该基因在植物苗期干旱胁迫中起负调控作用。
  (4)为了探究棉花GhPAO3基因在棉花中的作用,我们使用来自华中农业大学的CRISPR/Cas9表达载体pRGEB32-7作为基因编辑的载体,选择合适的靶点,设计引物,同时在设计引物时添加接头,利用重叠延伸PCR技术,将含有目标基因的小片段扩增出来,利用目的片段中含有的接头,连接两个小的目的片段。通过一步法将目的片段与经过单酶切后线性化的pRGEB32-7表达载体相连接,构建出敲除棉花GhPAO3基因的基因编辑的载体。以期验证该基因在棉花中响应干旱胁迫时的具体功能。
  结论:本研究初步鉴定了棉花GhPAO3基因在拟南芥中响应干旱胁迫时的功能,研究表明该基因在转基因拟南芥处于种子时期受到干旱胁迫时,可以提高种子抵抗干旱胁迫的能力;在转基因拟南芥处于苗期受到干旱胁迫时,该基因会导致植株抗旱能力下降,起到负调控作用;利用基因编辑技术,构建了敲除棉花GhPAO3基因的基因编辑表达载体,以期在后续实验中,验证该基因在棉花响应干旱胁迫时的具体功能。
其他文献
河北省自1995年以来,玉米播种面积总体一直处于增长状态,受国家农业供给侧结构性改革和调减“镰刀湾”地区玉米种植面积的政策影响,以及玉米临储政策取消,籽粒玉米出现波动的背景下,河北省积极探索改变传统种植方式、优化区域种植结构、推进农业供给侧改革的方式方法。河北省鲜食玉米品质独特、优良,糯玉米品种在全国具有一定的影响力,随着人民生活水平的提高和健康意识的增强,河北省玉米食用消费量呈稳定增长趋势。本文
学位
【目的】新疆是我国最大的优质商品棉生产基地,但随着近几年机采棉的大面积普及脱叶催熟剂的使用导致棉区棉纤维品质下降问题严峻,直接影响到新疆棉纤维加工质量的控制。温度作为重要的外界环境因素,与遗传因素一起被认为是影响纤维生长发育、品质形成的主要影响因素。本文以早熟陆地棉品种为供试材料,选取中早熟品种为对照,采用分期播种的方式,使棉铃发育处于不同的铃期温度中,以研究温度变化对纤维物质累积及品质形成的影响
学位
在基于振动信号的滚动轴承劣化趋势预测中,滚动轴承的振动信号具有非线性、随机性的特点,运用变分模态分解的方法提取信号中表征滚动轴承性能的能谱熵。并运用基于萤火虫优化的极限学习机对能谱熵时间序列进行预测,实现对滚动轴承劣化趋势预测。本文对基于变分模态分解和ELM的轴承劣化趋势预测方法进行了研究,主要工作内容如下:  (1)对滚动轴承的原始振动信号进行变分模态分解(Variational Mode De
学位
藻类-细菌共生ABS(algal-bacterial symbiosis system)系统作为一种新兴的生物废水处理技术,与传统的活性污泥CAS(conventional activated sludge system)系统相比,藻-菌共生系统不仅对于污染物有着更好的去除性能而且有着更低的运行成本。因此,它具有良好的应用前景。之前的研究中,发现XJK-小球藻,W6-丝状藻,902-月牙藻对于分散
学位
电催化氧还原反应(ORR)作为电化学反应技术可以将化学能转化为电能,广泛应用于燃料电池、金属-空气电池等电化学能源转换装置。铂等贵金属催化剂表面易吸附反应物,利于形成中间“活性化合物”,从而具有优良的催化活性、选择性和稳定性,被认为是目前最重要的ORR催化剂材料。然而,贵金属的储量少、价格昂贵,限制了催化剂大规模的应用推广。相比于贵金属电催化剂,廉价的非贵金属电催化剂也具有优异的电催化性能,特别是
学位
目的:探讨痛泻要方调控肠易激综合征(IBS)肝郁脾虚证大鼠海马、皮质、下丘脑中色氨酸羟化酶(TPH)和5-羟色胺转运体(SERT)含量的影响,试图解释痛泻要方治疗IBS肝郁脾虚的中枢调控机制。方法:将120只SD大鼠随机分成正常对照组、病理组、痛泻要方低剂量组、痛泻要方中剂量组、痛泻要方高剂量组和西药组,除正常对照组外,其余各组用“束缚应激(14天)+番泻叶灌胃法(7天)”复制IBS肝郁脾虚证大鼠
学位
目的以款冬花生品、蜜炙品及甘草炙品为研究对象,采用对比研究的模式,通过响应曲面试验优化炮制工艺;借助紫外可见分光光度法、高效液相色谱法定量分析,液相色谱质谱联用法定性分析,药效及体内外肝毒性试验,研究款冬花炮制前后成分及功效变化,阐释款冬花炮制机理。方法1.以酚酸类、黄酮类、款冬酮及总生物碱含量为评价指标,采用三因素三水平的响应曲面试验考察辅料用量、炒制温度、炒制时间对蜜炙及甘草炙款冬花炮制工艺的
学位
近年来,肺癌发病率和死亡率呈逐年上升趋势,已成为严重威胁人类生命健康的癌症第一杀手,急需新的防治措施来改善。药物免疫疗法是本世纪肿瘤治疗领域的重大突破,与直接靶向肿瘤细胞的传统化疗药物相比,其突出的特点是通过重储患者免疫能力消除肿瘤,有低毒高效治疗肿瘤的优势。目前,癌症免疫疗法的手段有激活先天性和继发性免疫。先天免疫是第一道防线,主要负责提呈抗原,也有部分直接清除病原体作用。继发性免疫能够特异性识
学位
目的:通过血液学及铁代谢指标判断生命早期铁失衡是否影响成年期大鼠铁代谢;探讨生命早期铁失衡对成年期大鼠脂质代谢及氧化应激的影响。方法:选择体重相近的健康Wistar雌性大鼠12只,适应性饲喂1周后随机分为3组:低铁组、富铁组和对照组,每组各4只。分别饲喂低铁饲料、富铁饲料、普通饲料,饲料干预2周后检测血液学指标确定各组之间的差异,然后与健康Wistar雄鼠进行同笼交配,母鼠怀孕期间继续饲料干预直至
学位
准确地提取作物面积以及估算作物产量,是保证国家区域政策制定和解决我国“三农”问题的一项有效途径,对分析我国的耕地利用情况有重要的意义,并且能够有效地保障国家粮食安全以及粮食进出口政策的实施。本研究依托国家重点研发计划项目“粮食作物产量与效率层次差异及其丰产增效机理(编号:2016YFD0300100)”开展研究,以东北三省为例,利用IDL可视化编程语言对MODIS-NDVI进行处理,继而有效提取东
学位