耐盐碱木霉菌株的筛选鉴定、抗病促生及耐盐机理研究

来源 :中国农业科学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ljb16591504
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本文从天津、河北和山东等地采集的盐碱土样品中分离、筛选耐盐碱木霉菌株,开展抗病、促生及解盐促生等功能研究,并对菌株的耐盐机理进行初步探索,结果如下:1.采用稀释平板法,从天津、河北和山东等地区采集的48份盐碱土样品中分离筛选得到20株耐盐碱木霉菌株,在含8%NaCl,pH8.0的PDA培养基中培养7d的菌落直径范围1.0-5.9cm。采用形态学、ITS以及TEF序列分析完成鉴定,13株为哈茨木霉(Trichoderma harzianum),3株为长枝木霉(T.longibrachiatum),2株为短密木霉(T.brevicompactum),2株为深绿木霉(T. atroviride)。2.采用平板对峙培养和发酵液抑菌两种方法完成20株耐盐碱木霉菌对瓜果腐霉菌(Pythiumaphanidermatum) ACCC38064、寄生疫霉菌(Phytophthora parasitica var. nicotianae) ACCC38065和交链格孢菌(Alternaria alternata)ACCC38066等3种烟草病害病原菌的拮抗筛选,选出10株进行温室盆栽防效的测定,接种ACCC38066后烟苗均未发病,10株木霉菌对烟草猝倒病和烟草黑胫病均有一定的防治效果,其中,17号菌株对两种病害的防治效果最好,对烟草猝倒病和黑胫病的防效分别为75%和100%,其次为7号菌株和4号菌株,16号菌株的防治效果最差。3.采用温室盆栽试验对10株生防效果较好的木霉菌的促生作用进行研究,1号菌株、7号菌株、11号菌株和14号菌株对烟苗茎叶部的生长具有促进作用,而1号菌株、7号菌株、11号菌株、14号菌株和18号菌株对烟苗根系的促生效果较好。选取1号、7号、14号菌株进行烟草、黄瓜温室盆栽盐胁迫下的促生试验。发现1号菌株可提高盐胁迫条件下烟苗的成活率及植株叶片中可溶性蛋白的含量,并显著提高烟苗叶片中POD的活性、降低MDA的含量。3株供试菌株均可提高盐胁迫下黄瓜幼苗的成活率,并显著促进植株根系的生长,提高植株叶片中可溶性蛋白的含量,1号菌株可显著提高黄瓜幼苗叶片中POD的活性。4.选择长枝木霉(6号、7号)、哈茨木霉(8号、11号)、深绿木霉(14号、18号)3对名称相同、耐盐能力存在差异的木霉菌株进行耐盐机理研究。NaCl浓度梯度转接试验发现,本研究中所采用的从低盐浓度往高盐浓度依次转接的方法不能诱导菌株耐盐能力的提高;对3对菌株的红外光谱测定发现,耐盐能力较弱的长枝木霉和深绿木霉体内各种有机物、蛋白质、脂类、磷酸盐化合物及多糖等的含量高于耐盐能力较强的菌株,而耐盐能力较弱的哈茨木霉体内各物质的含量低于耐盐能力较强的菌株;通过测定6号、7号2株长枝木霉在不同盐胁迫条件下菌株体内海藻糖、总游离氨基酸、谷氨酸、丙氨酸及脯氨酸的含量发现:0.25%-1%NaCl胁迫范围内,2株木霉菌体内海藻糖含量均呈上升趋势,6号菌株体内海藻糖含量增加缓慢,且始终低于无盐胁迫下培养菌株;7号菌株体内海藻糖含量升高较快,1%NaCl胁迫下菌株体内海藻糖含量最高,高于无盐胁迫下培养菌株;不管是否存在NaCl胁迫,7号菌株体内的海藻糖含量均明显高于6号菌株;1%NaCl胁迫条件下,供试菌株体内总游离氨基酸、谷氨酸、丙氨酸和脯氨酸的含量较无盐胁迫下提高,耐盐能力较弱的6号菌株的提高幅度大于耐盐能力较强的7号菌株,不管是否存在NaCl胁迫,6号菌株体内总游离氨基酸、谷氨酸、丙氨酸和脯氨酸的含量均明显高于7号菌株。
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