支气管哮喘中医证候分布规律及哮喘平冲剂对哮喘大鼠模型ERK通路的影响

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目的:1对116例支气管哮喘(Bronchial Asthma,以下简称哮喘)患者进行中医证候学调查,探究哮喘中医证候分布规律,为哮喘的中医辨证分型和治疗提供依据。2观察哮喘平冲剂对哮喘大鼠模型细胞外信号调节蛋白激酶(Extracellular signal regulated kinase,ERK)通路上游物血清血小板源性生长因-BB(Platelet-derived growth factor-BB,PDGF-BB),关键点肺组织磷酸化ERK1(p-ERK1),下游物肺组织c-Fos表达的影响,探讨哮喘平冲剂治疗哮喘的分子机制。方法:1临床研究:在查阅大量文献及结合临床经验的基础上,制定哮病证候证型调查表结合哮喘控制测试(ACT)评分及哮喘控制情况表,对符合入选标准的116例患者的资料,利用统计软件,分析年龄、性别、地区、职业、病因、体质等与证候学的关系,总结出哮喘的中医证候分布规律。2实验研究:将健康雄性的SD大鼠60只,以每组10只,分成正常对照组(Con组),模型对照组(M组),桂龙咳喘宁组(GL组),哮喘平冲剂高剂量组(XH组)、哮喘平冲剂中剂量组(XM组)、哮喘平低剂量组(XL组)等六个组。以卵蛋白(Ovalbumin,OVA)致敏、激发,制备大鼠哮喘模型。自第22天起,哮喘平冲剂各组和桂龙咳喘宁组开始给予药物灌胃治疗。连续用药2周后取材,运用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测各组大鼠血清PDGF-BB表达的水平,蛋白质免疫印迹试验(Western Blotting)法检测各组大鼠肺组织p-ERK1表达的水平,免疫组化法检测各组大鼠肺组织c-Fos表达的水平。结果:1临床研究:116例哮喘患者中,冷哮49例(42.24%),热哮32例(27.59%),寒包热哮4例(3.45%),风痰哮6例(5.17%),虚哮4例(3.45%),痰瘀阻肺11例(9.48%);肺气虚4例(3.45%),脾气虚2例(1.72%);肾阳气虚3例(2.59%);肾阴气虚1例(0.86%)。2实验研究:2.1大鼠血清PDFG-BB表达检测:与Con组相比,M组大鼠血清PDGF-BB含量显著高于Con组(P<0.01)。与M组相比,各治疗组的大鼠血清PDGF-BB含量均有降低(P<0.01)。XL组与GL组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。XM组、XH组血清PDGF-BB含量显著低于GL组(P<0.01)。2.2大鼠肺组织p-ERK1表达检测:与Con组相比,M组大鼠肺组织p-ERK1相对表达量显著高于Con组(P<0.01)。与M组相比,各治疗组的大鼠肺组织p-ERK1相对表达量显均有降低(P<0.05)。XL组与GL组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。XM组、XH组肺组织p-ERK1表达低于GL组(P<0.05)。2.3大鼠肺组织c-Fos表达检测:与Con组相比,M组大鼠肺组织c-Fos平均光密度值显著高于Con组(P<0.01)。与M组相比,各治疗组的大鼠肺组织c-Fos平均光密度值均有降低(P<0.01)。XL组、XM组与GL组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。XH组肺组织c-Fos表达显著低于GL组(P<0.01)。结论:1中医证候学调查发现:冷哮为哮喘的常见证候类型。2哮喘平冲剂治疗哮喘的分子机制可能是:通过下调EKR信号通路的上游物血清PDGF-BB、关键点肺组织p-ERK1、下游物肺组织c-Fos的表达,抑制ERK信号通路的活化,从而延缓哮喘的气道重塑。
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