论文部分内容阅读
一、研究背景乳腺癌是全世界常见的恶性肿瘤,是女性癌症死亡的主要原因之一。乳腺癌可以分为四个亚型:管腔上皮A型、管腔上皮B型、HER2过表达型、基底细胞型。基底细胞型乳腺癌是一种侵袭性乳腺癌亚型,传统治疗方案效果较差,且缺乏靶向治疗策略。因此,迫切需要深入研究基底型乳腺癌的分子发病机制,迅速筛查有效的靶向治疗药物,提高患者的整体生存率。二、材料和方法选取并下载肿瘤基因组图谱(TCGA)中乳腺癌的相关数据,包括转录组、拷贝数变异、临床资料和生存数据;通过基因差异表达分析,系统筛查基底细胞型乳腺癌特异性的发病机制及潜在的治疗靶点。整理并收集乳腺癌临床组织及相应临床资料,通过Western Blot验证候选基因在肿瘤和对照组织中的表达情况。构建加权基因共表达网络探讨候选基因促进乳腺癌发生发展的分子机制;通过基因敲低技术建立2种乳腺癌代表性细胞模型(T47D和MDA-MB-231细胞)以评价特定基因的表达对细胞增殖率的影响;通过流式细胞技术分析特定基因对于乳腺癌细胞周期、细胞凋亡的影响;综合以上分析探讨该基因在基底细胞型乳腺癌中的分子发病机制。三、结果与其他乳腺癌亚型相比,基底细胞型乳腺癌中存在WNT通路的异常激活;且在该通路中FRAT2(frequently rearranged in advanced T-cell lymphomas2)基因存在特异性的高表达。我们发现FRAT2的表达与基因组拷贝数的变化呈正相关;该基因的表达水平与基底细胞型乳腺癌的临床特征及疾病进展显著相关。加权基因共表达网络分析提示,FRAT2与肿瘤发生以及代谢通路有关。基于乳腺癌细胞模型的实验发现,在细胞周期不同阶段的T47D对照细胞中,G1期的细胞占所有细胞的63.9%,S期为9.4%,G2期为26.3%。相反,转染对照质粒的T47D细胞的细胞周期为G1阶段47.4%,S阶段为8.15%,G2阶段为44.0%。在G2期,T47D细胞的增殖受到明显抑制,更多的细胞被阻断。体外shFRAT2细胞组在G2/M期出现细胞周期阻滞,细胞凋亡增加。细胞凋亡实验显示,T47D对照组细胞中,Q2所占百分比为3.38%,Q3为3.34%。Q2和Q3中的单元格总数为6.81%。而在shFRAT2-1转染的T47D细胞中,Q2占13.6%,而Q3则占5.35%。Q2和Q3中的单元格总数为18.95%。四、结论FRAT2在基底细胞型乳腺癌组织中显著高表达,FRAT2表达水平与细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡密切相关。在临床方面,FRAT2表达影响了肿瘤发生发展。我们可以假设FRAT2是基底细胞型乳腺癌的潜在治疗靶点。本研究为基底细胞型乳腺癌的早期诊断、早期治疗提供新的策略,从而提高患者生存率。