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目的观察不同浓度胆固醇对滋养细胞坏死凋亡及尿酸产生的影响,以比较不同胆固醇水平培养滋养细胞产生的微粒对脐静脉内皮细胞凋亡的作用以及对血管内皮素产生的影响,进而探讨胆固醇水平在滋养细胞微粒导致子痫前期发病过程中的作用,为通过改变饮食习惯降低子痫前期发病率提供一定的理论支持。方法(1)用不同胆固醇浓度培养基培养滋养细胞(HPT-8系)24小时后,用Annexin V/PI双染色法检测不同胆固醇浓度培养基中滋养细胞坏死凋亡程度。同时用ELISA法检测不同浓度胆固醇培养滋养细胞24小时后上清液中尿酸的浓度。(2)用上述不同浓度胆固醇培养基培养滋养细胞后用冷冻法制备滋养细胞微粒,BCA法标定微粒蛋白浓度,采用酶联免疫分析法(ELISA法)检测各组微粒中碱性磷酸酶(PLAP)含量,推测胆固醇水平对滋养细胞微粒产生的影响。(3)用不同浓度胆固醇培养的滋养细胞微粒与脐静脉内皮细胞共培养,采用流式细胞仪Annexin V/PI双染色法观察脐静脉内皮细胞凋亡情况。并取上述细胞培养上清液,检测不同脂质水平的STBM作用于脐静脉内皮细胞后对内皮素(ET-1)产生的影响,推测脂质水平对子痫前期血管内皮功能紊乱的作用程度。结果(1)通过检测分析发现培养基中胆固醇浓度(0,25,50,100mg/L)越高,滋养细胞的凋亡率越高,尤其是早期凋亡率的增高更明显。细胞培养上清液中的尿酸水平也越高,而且呈现出剂量依赖性。(2)培养液中胆固醇浓度越高(0,25,50,100mg/L),滋养细胞微粒中碱性磷酸酶的浓度越高。(3)培养基中胆固醇浓度越高,滋养细胞微粒导致脐静脉内皮细胞凋亡的能力越强,差异有统计学意义,微粒诱导脐静脉内皮细胞产生内皮素的能力也越强,上清液中的内皮素浓度随胆固醇浓度增高而增高。结论培养基中胆固醇浓度越高,则引起滋养细胞坏死凋亡的能力越强,导致滋养细胞产生微粒的数量增加,引起脐静脉内皮细胞坏死凋亡的能力越强。同时高胆固醇浓度也会引起滋养细胞产生尿酸的水平增加,引起系统炎症反应及血管内皮系统功能的紊乱,从而在子痫前期的发病过程中发挥作用。高胆固醇来源的滋养细胞微粒可以引起脐静脉内皮细胞释放更多的内皮素,内皮素是机体中作用最强的缩血管物质,严重影响内皮细胞的舒缩功能,导致子痫前期的发生发展。综上,可推测人体摄入高胆固醇可以通过诱导滋养细胞坏死凋亡以及引起内皮系统功能紊乱,导致子痫前期的发生。因此,人们可以尝试通过适当减少胆固醇的摄入来降低子痫前期的发病率。