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目前,食用菌多糖的研究已经成为国内外的热点,研究表明多糖是食用菌中的最有价值活性成分之一,具有抗肿瘤、抗病毒、降血糖和增强免疫力等生物活性。杏鲍菇(Pleurotus eryngii)学名刺芹侧耳,为担子菌类侧耳科(Pleurotaceae)侧耳属,属于食用菇菌类。本文着重考察了杏鲍菇多糖纯化后的体外抗氧化、抗肿瘤活性,阐明了杏鲍菇多糖清除自由基以及抗肿瘤细胞的机制,为杏鲍菇多糖的开发应用提供了理论基础及技术支持。研究采用水提醇沉法来提取杏鲍菇中的粗多糖,提取率为5.4%,多糖总糖含量为61.3%。再经过对杏鲍菇粗多糖进行Sevag除蛋白、活性炭吸附脱色处理,最终得到无色脱蛋白杏鲍菇粗多糖。通过HPLC-UV检测技术来分析杏鲍菇粗多糖(PEP)的单糖组成,结果显示,PEP由8种单糖组成：甘露糖(9.8%)、核糖(1.6%)、鼠李糖(0.15%)、葡萄糖醛酸(0.8%)、葡萄糖(62.8%)、木糖(0.05%)、半乳糖(24.4%)、海藻糖(0.4%),其中葡萄糖、半乳糖以及甘露糖含量较多。由此说明,PEP是由8个单糖组分组成的杂多糖。通过一系列自由基的抗氧化实验,系统评价了的杏鲍菇多糖PEP的体外抗氧化能力,表明PEP具有一定的体外抗氧化活性,并且呈现出较好的剂量依赖效应。对杏鲍菇粗多糖进行DEAE-52纤维素柱层析,并采用G-100葡聚糖凝胶层析柱对得到的多糖组分进行进一步的纯化,DEAE-52纤维素柱层析洗脱后得到2种多糖组分且均为均一的组分,分别命名为PEP-1、PEP-2。紫外扫描结果显示,260-280 nm之间并没有吸收峰,表明PEP-1、PEP-2中不含核酸和蛋白质。红外光谱结果表明,在PEP-1、PEP-2的结构中均存在吡喃糖环结构。通过HPLC-UV对PEP-1、PEP-2的单糖组成进行进一步的检测,结果显示,组成PEP-1的单糖有甘露糖(mannose)、葡萄糖(glucose)以及半乳糖(galactose),组成PEP-2的单糖同样为甘露糖(mannose)、葡萄糖(glucose)以及半乳糖(galactose)。经过高效液相凝胶渗透色谱分析,得到PEP-1、PEP-2的分子量分别为25362D,463396 Da。通过MTT、LDH实验可以得知,与PEP-1相比,PEP-2对人肝癌细胞HepG2有明显的抑制增长作用,且与浓度呈量效关系。DAPI染色发现,这些凋亡使细胞出现了染色质凝集,核碎裂和调亡小体出现等特征。Annexin V-FITC/PI检测PEP-2引起的凋亡结果显示,经PEP-2处理的细胞在6 h之后,就出现了20.49%的早期凋亡,晚期凋亡占到4.27%；而在24 h后,早期凋亡达到35.71%,晚期凋亡也增加到了20.63%,由流式细胞仪检测得出,PEP-2将人肝癌细胞HepG2的生长阻滞在了S期。利用流式细胞仪检测PEP-2诱导的HepG2细胞的活性氧水平,结果显示,随着作用时间的增长,细胞内H2O2水平即得到了明显的升高,因此初步推断,在PEP-2发挥抗肿瘤作用的时候,ROS起到了介导细胞凋亡的作用。本实验从杏鲍菇中提取分离纯化得到2种多糖组分,并对其结构进行了初步的检测与观察,并筛选得到一种组分PEP-2(分子量为46 WDa)具有显著的抑制肝癌细胞的增殖作用,其中ROS在过程中起到了介导凋亡的作用。这一研究发现对研究多糖的抗肿瘤的机制指明了思考的方向,并为功能性食品因子或药物的开发提供了理论依据。