脊髓损伤动物模型的制作

被引量 : 0次 | 上传用户:chenchaozhi
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的 脊髓损伤(SCI)所致的肢体功能障碍是一种严重的伤残,临床治疗上的进步有赖于脊髓损伤实验研究的发展。成功的实验研究又有赖于既能反映人类脊髓损伤的特点,又便于进行观察和施加处理因素的动物模型的建立。而能够再现脊髓损伤的运动功能障碍是建立动物模型的首要要求。脊髓损伤后的功能障碍主要由于轴索的断裂、神经元和胶质细胞的缺失、以及脱髓鞘病变等原因。脊髓的病理改变不仅仅来源于原发性损伤,而且来源于继发的一系列损伤,包括缺血、缺氧、自由基、兴奋毒性等等,这些继发损伤通常在原发性损伤后数天或数小时后发生。中枢神经系统轴突的再生主要被下列因素抑制:髓磷脂相关的抑制因子、成人神经系统中缺少克服抑制因子和伤后胶质瘢痕屏障的始动因素。近年来对脊髓损伤后治疗的实验研究已经取得了令人振奋的进步:通过拮抗抑制因子、阻断继发性损伤的作用途径的方法,减少脊髓功能障碍、促进轴突生长;神经干细胞、雪旺细胞和嗅鞘细胞移植治疗;神经生长因子和小分子治疗;胚胎组织或神经生长支架移植等。但是,至今仍没有对脊髓损伤治疗的确切有效方法。 首都医科大学神经外科研究所研制出一种能够协助和促进损伤脊髓组织中轴突生长的管型生物材料,在外周神经动物实验中取得了离端神经纤维生长80mm的成果。该材料应用于脊髓损伤进行治疗,需要特定的脊髓离端动物模型。根据继往研究经验,结合预实验观察,本实验制作了大鼠脊髓组织部分或全部切除的半横断和全横断脊髓损伤动物模型,以便于对该种管型材料的研究提供实验基础。 方 法 成年雌性SPnge一Dawey大鼠30只、体重200-3009、平均2559。随机分为 3组:对照组(N二 10人脊髓半损伤组(N=10X脊髓全损伤组(N=10人手术过程中,对所有实验大鼠使用同一把自制的Znun切割刀具,以确保脊髓损伤标准一致。同时,脊髓半损伤组的损伤侧随机确定,避免由于术者手术习惯产生误差。分别于术后第一周内每日、第二3上5为*在周等14个时间点,将各组实验动物置于平面场地爬行,按照BBB评分标准观察、分别记录动物双后肢运动功能恢复情况。由于大鼠昼夜活动差异,所有观察均在晚8时进行。术后8周取两种模型中BBB评分接近平均得分的大鼠各一只,过量麻醉处死动物,4%多聚甲醛常规灌注固定,取材置于30%蔗糖溶液中4℃脱水过夜,恒冷箱连续矢状切片问0 pM入 Hematotin/eosin(H&E)染色。光镜下观察脊髓组织形态学变化。实验记录了脊髓全横断切除组、单纯椎板磨除的对照组在术后不同时间左、右两侧肢体的运动功能恢复情况和脊髓半横断切除组在术后不同时间损伤侧和损伤对侧的运动功能恢复情况,进行sss评分,得到 6组 sss评分结果。使用 sshaog。roy-SllllnlW方法检验所得数据的分步特性,结果显示术后任何时间点各组的BBB数值符合近似正态分布;在此基础上,对术后不同时间点各组的BBB数值,使用ANOVA方法进行统计分析:一,以BBB为观察值,探讨各组间,不同观察时间两个因素,其均数的差异是否有显著差别(Univariate nalsis of Variance*如果有则进一步进行 SNK Student-Newman-Keuls MultiPle Ranse检验h检验)将 6组的 BBB评分两两分别比较;二,各个数据组中,不同观察时间BBB是否有显著差异(O。-Way-ANOVA);如果有则SNK Student-Newman-Keuls Multiple Rang6检验*检验)将各个观察时间BBB两两分别比较,并作图,观察出脊髓功能 ·2·随时间的变化情况。 结 果 6组 BBB评分结果 Univariate nalysis of Variance分析有显著性差异;同时,除全横断模型、对照组组左侧BBB评分和右侧BBB评分之间无显著性差异外,其余各组间存在显著差异。脊髓半横断切除实验组的损伤侧BBB,术后l在J/3在周各个相临观察点之间BBB有显著差异,术后二周内和术后6周以后各个相临观察点之间BBB无显著差异。脊髓半横断切除实验组的损伤对侧BBB,术后1在*/j周各个相临观察点之间BBB有显著差异,术后二周内和术后5周以后各个相临观察点之间BBB无显著差异。脊髓全横断损伤组和对照组左右两侧肢体BBB,术后8周内各个相临观察点之间无显著性差异。组织形态学:8周实验动物脊髓组织切片,H&E染色示:脊髓半损伤组损伤对侧可见少量白质残留,损伤范围扩大,越过中线,损伤侧无神经纤维残留;脊髓全损伤组于损伤全长未见脊髓组织残留,同时损伤头侧和尾测可见胶质。癫痕,且损伤长度增加。 讨 论 本实验中采用磨钻磨除棘突和椎板。尽可能减少暴露脊髓过程中对脊髓的损伤。实验结果证明,仅行椎板磨除的对照组实验动物术后无一例出现脊髓功能障碍。实验中使用了剃须刀片自制的长度Zrnm?的切割刀,脊髓切除时,确保切割长度和切割范围恒定,不但将脊髓损伤标准化;而且,切割刀在手术过程中并不抽出,延长的刀身具有脊髓压板的作
其他文献
数控机床是装备制造业的关键装备,是关系到国家经济建设与战略地位,体现国家综合水平的重要标志。介绍我国数控机床的产生背景、发展过程与现状,重点分析了取得的成果及存在
本试验研究了弱光对不同栽培型和生态型黄瓜苗期形态指标、生理生化指标及光合特性的影响,以筛选出耐弱光性的鉴定方法,为生产提供理论依据和为育种工作者服务。试验结果如下:两
<正> 时下,拥有一辆汽车对大多数中国人来说仍是那么的高不可攀,但梦寐以求者却比比皆是。在中国各大城市里举行的汽车展览会上常常是人头攒动,热闹非凡,而有关汽车的杂志也
金融机构个体最优能否导致金融市场整体最优,或金融市场整体最优是否是金融机构个体最优的集合,对这个问题进行深入研究,有助于正确界定金融机构和政府监管部门在金融市场中
"80后"高校教师是伴随改革开放成长起来的特殊群体,各高校要采取有效措施提高他们的教书育人能力。具体措施为:以思想教育为根本,激发扎根院校、无私奉献的工作热情;以提升能
营业税改增值税,简称"营改增",是指从前缴纳营业税的应税项目改成缴纳增值税,使企业减少了重复纳税的环节。其目的在于加快财税体制改革并且进一步减轻企业的赋税,提高各方积
本文提出了一种新型气缸套与活塞环表面处理技术:气缸套与活塞环表面微刻蚀与微颗粒复合填充技术。并通过试验检测了其减摩抗磨效果。本文首先对活塞环进行微刻蚀试验,探寻活
建设工程项目由于工期长、投资大,参与主体多,组织关系复杂,在实施过程中不确定性因素很多。因而,建筑承包商在项目实施过程的各个阶段将面临各种风险,而在工程项目实施的全过程中
刘禹锡的诗歌表现为豪健与清丽两种艺术风格的结合。本文从两个角度切入,正文的第一部分为纵向对其诗歌分期研究,特别注重分析其两次贬谪时期诗歌艺术风格的差异,在前人的研究基