樟树体细胞胚再生体系的优化及遗传转化研究

来源 :华中农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lgfgdf
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
樟树(Cinnamomum camphora L.)原产于中国,其树形优美、木材致密、固土防沙、吸烟滞尘、抗逆性强,是一种重要的经济林木和园林绿化树种。但由于其结实量大、花粉飘散,污染环境,影响城市环境和行人,在一定程度上限制了其应用和推广。为了减少樟树果实造成的环境污染,同时减少飘散于空气中的花粉对人体健康造成的危害,扩大樟树从南至北的种植范围,利用植物基因工程技术培育无果和抗寒樟树是解决这些问题的有效途径。因樟树幼年期长,需多年才能达到成熟,为了早日看到樟树转化Barnase不育基因后植株在表型及生理上的变化,同时进行了樟树转化PaFT早花基因及Barnase-PaFT复合基因的研究。  本研究在前人基础上,首先对樟树的体细胞胚再生体系进行了优化,深入探讨了影响樟树体细胞胚发生、成熟和萌发的因素。并利用相关试验设计完善了其遗传转化体系。研究的主要结果如下:  1.优化了樟树的体细胞胚再生体系。结果表明:  (1)合子胚直径大小显著影响体细胞胚诱导率:直径为1.5-2.0mm、1.0-1.5mm、0.5-1.0mm的合子胚的体细胞胚诱导率分别为46.67%、52.00%、26.67%,综合分析,采用直径1.0-1.5mm的合子胚较为适宜。  (2)母树基因型显著影响体细胞胚诱导率:两棵不同母树的体细胞胚诱导率分别为79.78%和32.42%。  (3)光照条件显著影响体细胞胚诱导率:光照条件和黑暗条件下的体细胞胚诱导率分别为79.78%和53.74%,应在光照条件下对体细胞胚进行诱导。  (4)不同种类的渗透剂显著影响体细胞胚诱导率:0.5M和1.0M的蔗糖、麦芽糖、甘露醇溶液中,0.5M麦芽糖与0.5M蔗糖溶液对体细胞胚的诱导率无显著差异,分别为69.05%和79.98%,但0.5M蔗糖溶液诱导得到的平均体细胞胚数较多。综合分析,0.5M蔗糖溶液的诱导效果最佳。  (5)合子胚手术不仅无益于体细胞胚的诱导,也无用于胚性愈伤的诱导,在樟树体细胞胚的诱导中还是采用全胚接种的方式较为适合。  (6)添加BA和毒莠定不利于樟树细胞胚的诱导,也不利于其胚性愈伤组织的诱导。  (7)不同浓度的NAA和2,4-D对樟树胚性愈伤组织的诱导效果不同:综合来看,樟树胚性愈伤组织的诱导应采用基因型较为适宜的胚性系,诱导培养基采用添加1.0mg/L NAA的MS培养基。  (8)PEG、低温和干化处理对体细胞胚的成熟与萌发有一定作用:低温处理5周可以使体细胞胚的萌发率达到22.96%,显著提高了樟树体细胞胚的萌发潜力;干化处理5d时体细胞胚的萌发率达到最高,正常芽叶百分率达到42.74%,与其他干化处理的结果存在显著性差异;低温处理和干化处理相结合的效果并不理想;在4℃低温下,不同浓度的PEG6000没有显著提高体细胞胚的萌发率,对樟树体细胞胚的成熟和萌发并没有显著作用。  2.通过根癌农杆菌介导Barnase-PaFT,PaFT和PmCBFb转化樟树胚性愈伤组织,分别获得转化Barnase-PaFT和 PaFT的抗性植株,PCR检测表明:转化Barnase-PaFT有4个株系检测到目标条带,而转PaFT基因有1个株系检测到目标条带。初步表明Barnase-PaFT、PaFT基因已转入樟树基因组中,转化PmCBFb的体细胞胚正在成熟萌发处理之中。
其他文献
文心兰(Oncidium),属兰科文心兰属。植株轻巧,花茎分枝性良好、轻盈下垂,花朵奇异可爱,花姿秀美,形似翩翩起舞的女孩,是一种非常美丽而极具观赏价值的兰花,近年来倍受国际花
通过研究川西南天然常绿阔叶林凋落物分解和土壤呼吸特征,以及模拟氮沉降下亚热带天然常绿阔叶林生态系统可能发生的变化,为提高亚热带常绿阔叶林生态系统的经营和管理水平提供
目前,我国正在进入一个快速城市化时代,随着城市的不断发展,城市规模的一再扩张,也产生了诸多问题。比如生态环境恶化、资源浪费、气候改变、自然灾害频繁、生物多样性减少等等。
在室内条件下,以欧洲黑杨无性系为试材,通过不同梯度的控水处理,测定不同土壤水分胁迫条件下(正常条件、中度胁迫和重度胁迫条件)苗木苗期的各项生长指标、生理及生化指标。
忽地笑(Lycoris aurea Herb)为单子叶石蒜科(Amaryllidaceae)石蒜属(Lycoris)植物。其主要次生代谢产物加兰他敏,传统上是治疗重症肌无力、小儿麻痹后遗症的要药;最新发现其具
随着科学技术的发展,为高层建筑发展创造了前所未有的机遇,高层建筑也成为城市空间中一道独特的风景,而高层建筑结构形式趋于多样化,高层建筑的表现形式也多种多样,但随之所
福建省建瓯万木林自然保护区,其群落复杂,种类繁多,为典型的森林生态型保护区,形成的群落发育良好,林相整齐,其优势种多为国家或省级保护植物,万木林作为保护区,受人类活动的影响较小
树木体内养分内循环在森林生态系统的能量流动和物质循环中起着重要的作用。树木细根在死亡脱落时,其内部的部分养分可能转移到其它器官被重新利用,这对于树木减少养分损失有