大孔吸附树脂和逆流色谱分离纯化莱菔硫烷的研究

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莱菔硫烷(CH3S(O)CH2CH2CH2CH2N=C=S)是目前公认的防癌和抗癌效果最好的天然产物之一,是自然界存在的诱导Ⅱ型解毒酶能力最强的诱导物。随着研究的深入,人们发现莱菔硫烷不仅可以提高机体抗氧化的能力,而且还可以抑制并杀死癌细胞。考虑到莱菔硫烷在今后的癌症预防和治疗中必将发挥的积极作用,科研工作者们已经将其视为研究的热点。本文利用大孔吸附树脂和制备高速逆流色谱来分离纯化莱菔硫烷。本文研究了不同大孔吸附树脂对于莱菔硫烷的吸附和解析特性,发现SP850具有最大的吸附率,而且对吸附机理进行了Langmuir和Freundlich模型拟合,Langmuir和Freundlich方程的相关系数(R2)均>0.9300。为了优化分离工艺,采用SP850填充柱进行了动态吸附和解析实验。结果表明吸附的最佳参数是:流速:5BV/H,pH2,温度:25℃;解析:乙醇.水(40:60,v/v),6BV洗脱液,流速:6BV/H。莱菔硫烷的最高纯度达到85.9%,即是青花菜种子中含量的107倍。此结果显示SP850树脂对于分离莱菔硫烷有很高的效率。天然产物中活性成分的分离会面临很多问题,比如目标活性物的含量在复杂混合物中比重很小。本文采用高速逆流色谱(HSCCC)从青花菜种子中分离和纯化莱菔硫烷。通过分析型HSCCC获得溶剂系统是正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(1:5:1:5,v/v),并在此溶剂体系下采用制备HSCCC,分离982.1mg粗提物(纯度是30.4%),可以得到纯度大于90%的莱菔硫烷286.6mg。本文还对四种纯化方法(低压正相制备色谱,反相制备色谱,大孔吸附树脂分离和制备逆流色谱)的产品纯度、分离周期和生产成本进行了比较。结果显示,大孔吸附树脂生产中等纯度产品具有经济性;产品纯度大于90%时,宜采用制备逆流色谱和制备反相液相色谱。
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