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本实验采用离子液体对香茶藨子叶总黄酮进行高效快速提取,研究了离子液体微波辅助提取工艺,并对工艺参数进行优化,同时结合大孔吸附树脂对香茶藨子叶总黄酮进行分离纯化,并对纯化物进行抗氧化以及抗炎活性评价。本论文建立了一种高效、快速提取纯化香茶藨子叶中总黄酮和成分分析检测方法,为高效利用以及合理开发香茶藨子资源提供了理论依据。具体研究结果如下:1.对离子液体微波辅助提取香茶藨子叶中总黄酮的条件进行了实验设计以及工艺参数的优化,确定的最优提取参数:离子液体:1-丁基-3-甲基咪唑溴盐离子液体浓度:1.6 mol/L液固比:33:1 mL/g提取温度:60℃提取时间:15 min微波功率:600 W在上述优化的条件下对香茶藨子叶进行提取,总黄酮的平均提取率为44.82 mg/g,提取效果优于乙醇微波辅助提取和离子液体超声辅助提取。2.选用大孔吸附树脂对离子液体微波辅助提取的香茶藨子叶总黄酮进行分离纯化处理,选择了6种大孔吸附树脂进行筛选实验,从中选出2种大孔吸附树脂进一步进行静态动力学分析,最终选择AB-8型号树脂进行动态实验,实验结果显示,分离纯化香茶藨子叶总黄酮的最佳单因素为:上样浓度:1.10 mg/mL上样速率:2 BV/h乙醇浓度:70%乙醇洗脱速率:3 BV/h按照以上最佳纯化条件操作,所得到的香茶藨子叶总黄酮的纯度由纯化之前8.61%变为纯化之后36.68%,总黄酮纯度提高了4.26倍,回收率为78.12%。同时建立了HPLC检测分析纯化后的香茶藨子叶总黄酮中的芦丁、异槲皮苷、紫云英苷、槲皮素、山柰酚的方法:色谱柱:Diamonsil C18 column(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:0.4%磷酸水溶液(A)-乙腈(B);柱温30℃;检测波长360 nm;流速为1.0 mL/min;进样量20μL;梯度洗脱条件:0-15 min,10-18%(B);15-30 min,18-18%(B);30-35 min,18-20%(B);35-40 min,20-30%(B);40-45 min,30-60%(B);45-50 min,60-10%(B);50-55 min,10%-10%(B)。3.通过DPPH自由基清除率实验、FRAP总抗氧化能力实验、ABTS自由基清除能力实验测定不同的提取方法下得到的纯化物的抗氧化活性。DPPH自由基清除率实验结果为:V_C>离子液体微波辅助提取纯化物>离子液体超声辅助提取纯化物>乙醇微波辅助提取纯化物;FRAP实验结果为:V_C>离子液体微波辅助提取纯化物>离子液体超声辅助提取纯化物>乙醇微波辅助提取纯化物;ABTS自由基清除能力实验同样证明离子液体微波辅助提取纯化物有更优的抗氧化性能。通过MTT法研究三种不同提取方法下得到的纯化物对RAW264.7细胞活力的影响,结果显示,在0~200μg/mL浓度范围内,各给药组不会对细胞产生毒性危害。在同样浓度条件下,离子液体微波辅助提取纯化物对LPS诱导的RAW264.7细胞分泌的NO的抑制作用好于另外2种提取方法得到的纯化物,且随着样品浓度的提高,RAW264.7细胞分泌的NO含量略有减少的趋势,当给药浓度均为200μg/mL时,离子液体微波辅助提取纯化物、离子液体超声辅助提取纯化物和乙醇微波辅助提取纯化物的亚硝酸盐含量依次为22.35、24.44和27.25μmol/L,此时离子液体微波辅助提取纯化物表现出的抑制NO分泌效果略好于阳性对照。综上所述,离子液体微波辅助提取技术非常适用于香茶藨子叶总黄酮的提取,离子液体微波辅助提取并结合吸附树脂分离的方法为天然产物提取纯化提供了一种环境友好技术。