论文部分内容阅读
背景和目的:阿尔茨海默病（Alzheimer disease,AD）是一种以进行性记忆力减退、认知功能障碍为特征的中枢神经系统变性疾病。其病理特征为神经元胞外淀粉样β蛋白（β-amyloid,Aβ）沉积为主形成的神经炎性斑块,神经元内神经原纤维缠结（neurofibrillary tangles,NETs）,海马和皮层区域为主的神经元大量丢失。迄今其病因及发病机制仍不明确。但大多数学者认为β淀粉样蛋白沉积激活小胶质细胞引起的炎症反应是AD的核心病理机制。祖国医学中有许多中药由于其多靶点的优势对AD的治疗有其独特的优势。本文探讨脑灵汤对阿尔茨海默病（AD）模型大鼠行为学、海马组织形态学及海马CA3区小胶质细胞和IL-6表达的影响,为进一步阐明AD的发病机制和寻找治疗AD的有效药物提供理论基础。方法:选用纯系SD大鼠（雌雄各半）40只随机分为5组,每组8只,分别为正常组、假手术组、模型组、西药（脑复康）组、中药（脑灵汤）组。喂养一周后,大鼠双侧海马注射聚集态Aβ1-42建立AD模型,造模后喂养三周,共治疗四周,四周后采用Y—迷宫和Morris水迷宫进行行为学检测。取大鼠脑组织作冰冻切片,行刚果红染色检测海马内是否有Aβ的沉积;HE染色、Nissl染色观察大鼠海马组织形态学改变;用免疫组化法观察OX-42和IL-6在大鼠海马CA3区组织神经元中的表达。结果:1.Y—迷宫实验:中药组（P＜0.05）和西药组（P＜0.05）躲避电刺激所需的次数均明显少于模型组,具有统计学意义。Morris水迷宫实验:隐匿平台搜索实验中,模型组逃避潜伏期最长,与中药组和西药组比较有显著性差异（P＜0.05）;探索实验中,正常组和假手术组大鼠的平均穿越次数最多,中药组和西药组大鼠的穿越次数又多于模型组,比较有显著性差异（P＜0.05）。2.三种染色:刚果红染色:模型组、中药组和西药组均有Aβ的沉积,但中药组和西药组较模型组明显减少。HE和尼氏染色:正常组和假手术组海马CA3区锥体细胞排列整齐,无明显神经元丢失;模型组大鼠海马CA3区神经元数目明显减少,锥体细胞排列稀疏、紊乱,见胶质增生,锥体细胞数目与正常组和假手术组比较明显减少（P＜0.05）;中药组和西药组较模型组大鼠海马CA3区神经元数目增多,细胞排列整齐。3.各组大鼠海马CA3区OX-42和IL-6阳性细胞数比较,模型组最多,中药组和西药组高于正常组和假手术组（P＜0.05）,具有统计学意义。各组大鼠海马CA3区灰度值比较,模型组显著低于正常组和假手术组灰度值（P＜0.05）;中药组和西药组大鼠海马CA3区灰度值较模型组显著增加（P＜0.05）,具有统计学意义。结论:（1）本实验研究结果表明向大鼠海马内注射Aβ1-42建立的AD模型大鼠出现了AD的一些特征性行为学及病理改变,说明造模是成功的。（2）Y—迷宫和Morris水迷宫实验表明AD模型大鼠学习记忆能力明显下降,脑灵汤可明显改善模型大鼠的学习记忆能力。（3）脑灵汤能减轻AD大鼠海马CA3区神经元丢失现象,改善AD大鼠海马锥体细胞形态,说明脑灵汤对AD大鼠海马CA3区神经元具有保护作用。（4）免疫组化结果表明脑灵汤可降低AD大鼠海马CA3区OX-42和IL-6的表达,这可能是脑灵汤治疗阿尔茨海默病的部分作用机制。