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自从1926年,新城疫(Newcastle disease, ND)这种严重危害养禽业发展的疾病被发现以来,已造成了多次的世界范围内大流行,给各国养禽业带来了不同程度的危害。从上个世纪70~80年代,随着疫苗广泛使用,使ND的发生明显减少,已经很少听到有关新城疫大规模暴发的报道了。同时,伴随疫苗的普遍使用,ND的发生,也有了一些新的变化,经过多次疫苗免疫的鸡,或者ND抗体很高的鸡,依然会出现ND的发生。有报道显示:出现这种情况的原因,可能是由于我国对ND实施强制免疫政策、多次的或者不合理的免疫所造成的。因此,对某一地区ND地方流行株的分离鉴定,鉴别毒株的强弱、序列分析等研究,都将有助于了解该地区ND地方毒株发生发展的变异规律。另外一点,我们可以通过部分免疫学的研究,了解到现有的疫苗能否对该地区形成有效的保护,对于完善某一地区ND的防控工作具有重要的参考意义。本课题主要是对长春地区NDV地方株进行研究。2012年8月至2013年9月,对长春市净月、双阳、德惠等6个地区疑似ND发病鸡群进行病料的采集。将采集到10份疑似ND病料(Jilin-CC-01、Jilin-CC-02、Jilin-CC-03、Jilin-SY-04、Jilin-DH-05、Jilin-DH-06、Jilin-JT-07、Jilin-JT-08、Jilin-NA-09、Jilin-YS-10)接种于10日龄SPF鸡胚尿囊腔,鸡胚均在24~72h之间死亡。通过血凝试验(HA)、血凝抑制试验(HI)及RT-PCR对10份分离的鸡胚尿囊液进行分析证明成功分离到10株NDV。根据毒力判定三项指标即MDT指标值、ICPI指标值、IVPI指标值进行毒力测试,结果表明10个NDV地方分离株均为强毒株。对10个分离株进行动物感染试验发现均能够引起动物发病与死亡,发病率多集中在80%~100%,死亡率多集中在60%~100%,攻毒鸡群2~3d出现症状,3~6d开始有死亡,并且发病症状与自然感染发病的鸡基本相同。同时从10个鸡群每个鸡群中采集到的30份血清样品进行检测,抗体效价均比较低,并且高低参差不齐。根据10个NDV分离株F基因序列绘制进化树,分离株分别与北京(KF935230)、山东(JN400897)、吉林(KC542899)、辽宁(KC542905)分离到的强毒株有重要的亲缘关系:Jilin-CC-01与KF935230亲缘关系较近,与其同源性达91.67%;Jilin-CC-02、Jilin-CC-03与KF935230处于同一分支,同源性分别达92%、92.66%;Jilin-SY-04与Jilin-DH-06处于同一分支,与JN400897同源性分别达97.41%、98.17%;Jilin-DH-05与KC542899处于同一分支,亲缘关系较近,同源性达99.59%;Jilin-JT-07,Jilin-JT-08处于同一分支,亲缘关系较近,与KC542905同源性相对较近,同源性分别达94.83%、94.29%。Jilin-NA-9、Jilin-YS-10与KC542905同源性分别达96.71%、95.93%。Jilin-DH-05与KC542899亲缘关系较近,同源性达99.59%。选择Jilin-DH-05为疫苗研究对象,Jilin-DH-05灭活苗与LaSota灭活苗比较发现,ELISA方法检测发现,两者体液免疫水平持续升高,在56天仍能保持较高水平,全血淋巴细胞转化率检测发现,两者细胞免疫水平在28天前明显上升,在28天后开始下降。Jilin-DH-05灭活苗产生的免疫效果与LaSota灭活苗相同,所以现有疫苗完全能够保护当地流行毒株的攻击。