论文部分内容阅读
疟疾是全球关注、高发的感染性疾病，对人类的生命安全造成了严重的威胁，阐明宿主抵抗疟原虫感染的保护性免疫应答的发生机制，研制行之有效的疟疾疫苗，寻找具有良好作用的抗疟药物和抗疟药物辅助剂是目前控制疟原虫感染和再感染急需解决的问题。胸腺素α原(prothymosinα，ProTα)具有广泛的生物学活性，参与对细胞周期的调节，促进细胞增殖，还可以提高免疫细胞活性和增强免疫细胞因子分泌，增强树突状细胞的活性，对于抗原的呈递具有重要作用，有望成为一种很好的候选免疫佐剂和抗疟辅助药物。
本实验研究了约氏疟原虫致死性虫株P.yoelii-17XL、非致死性虫株P.yoelii-17XNL与重组人ProTα之间的关系。实验证明感染了P.yoelii-17XL的小鼠肝脏细胞中有大量ProTα高表达。通过内脏器官指数测定和病理学切片发现，感染了两株疟原虫的小鼠肝脏、脾脏、胸腺均受到了明显的损伤。采用感染P.yoelii-17XNL的小鼠血清通过皮下注射的方式注射到感染了P.yoelii-17XL的小鼠体内，可以使这些小鼠的疟原虫血症水平下降，并提高小鼠的存活率(提高了25％)。该结果提示经P.yoelii-17XNL感染的小鼠血清中含有效抵抗疟疾感染的特异性抗体存在。
采用超声破碎法提取了红内期P.yoelii-17XNL和P.yoelii-17XL的全虫可溶性蛋白作为抗原开展保护小鼠抵抗P.yoelii-17XL感染的研究。应用感染了疟原虫后存活下来的抗血清作为抗体，对两种抗原进行Western-blotting免疫印迹实验，结果显示在19KD、23KD、33KD和48KD等处有明显的杂交条带，这些蛋白与文献报道的裂殖子表面蛋白分子量接近。从另一方面证明这些抗原是具有诱导机体产生有效抗体的抗原成分。
应用P.yoelii-17XNL全虫可溶性蛋白作为抗原，ProTα作为免疫佐剂进行保护性实验，经过抗原和佐剂免疫小鼠后，再感染P.yoelii-17XL。结果表明免疫过的小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能增强；用P.yoelii-17XNL全虫可溶性蛋白作为抗原、用ProTα作为佐剂免疫的小鼠抵抗疟原虫感染的保护效果要比单独使用P.yoelii-17XNL全蛋白免疫效果好，提示了ProTα在作为疟疾疫苗佐剂方面的潜在作用。
通过单独腹腔注射ProTα的实验结果表明，提前腹腔注射ProTα一段时间，再感染P.yoelii-17XL，可以大大降低小鼠的疟原虫血症水平，提高小鼠的存活率，表明单独使用ProTα就能够有效达到抵抗疟原虫感染的效果。为今后作为辅助抗疟药物方面的研发有重要理论和应用价值。