吡格列酮减轻高磷致大鼠血管平滑肌细胞转化的作用及其机制探讨

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目的:探讨过氧化物酶体增殖物活化受体γ(Peroxisome proliferator-activated receptor gamma,PPARγ)激动剂吡格列酮(pioglitazone,PIO)对高磷诱导大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)钙化的作用及其相关机制。方法:利用l0mmol/L β-甘油磷酸(β-glycerophosphate,β-GP)诱导大鼠VSMC钙化,建立钙化模型,即为钙化组;同时以完全培养基培养大鼠VSMC为正常对照组,并分别以不同浓度(5、10、15、20μmol/L)PIO干预,观察培养12d,用茜素红染色法检测细胞钙沉积并检测细胞外基质钙离子浓度,以观察VSMC钙化程度;Western Blot 检测大鼠 VSMC 的 α-SMA、Runx2、BMP-2、Wnt/β-catenin 通路相关蛋白(β-catenin,GSK-3β,p-GSK-3β)以及核蛋白cyclin-D1的表达情况。选择合适浓度(20μmol/L)的PIO并加PPARy拮抗剂GW9662(20μmol/L)干预,观察以上指标的变化。结果:1、钙化组检测的钙离子浓度较正常对照组明显增高(P<0.05),而不同浓度PIO均可减轻VSMC细胞外基质的钙离子浓度(P<0.05),同时钙化组茜素红染色较正常对照组明显,而20μmol/LPIO干预组茜素红染色较钙化组减轻最为明显;2、钙化组大鼠 VSMC 表达 Runx2、β-catenin、p-GSK-3β、BMP2、cyclin-D1较正常对照组升高;20μmol/LPIO可显著下调钙化大鼠VSMC表达Runx2、β-catenin、p-GSK-3β、BMP2 和 cyclin-D1,并上调 α-SMA 的表达;3、PPARy拮抗剂GW9662可部分阻断PIO对钙化大鼠VSMC的干预作用。结论:PPARy激动剂吡格列酮可以减轻β-甘油磷酸诱导的大鼠血管平滑肌细胞的钙化,其作用机制与激活PPARy继而下调Wnt/β-catenin信号通路活性有关。目的:对接受连续性肾脏替代治疗(continuous renal replacement therapy,CRRT)的急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)患者应用生物电阻抗(Bioelectrical impedance vector analysis,BIVA)测定其治疗前、后液体负荷(overhydration,OH)变化,以探讨BIVA能否应用于AKI-CRRT患者的容量评估。方法:选取我中心14例健康志愿者为正常对照组,22例终末期肾脏病行维持性血液透析患者为透析组,35例AKI并行CRRT治疗的患者(男23例,女12例)为AKI-CRRT组。正常对照组饮水前后,普通血透患者及CRRT患者透析前、后均行BIVA检测,分析三组体重变化、前后两次BIVA检测之间净出入量与BIVA液体负荷指标变化(TBW、ECW、ICW、OH)的相关性和一致性。结果:(1)健康志愿者饮水前、后BIVA参数变化值较小,没有统计学意义;规律血透患者透析前、后BIVA参数变化值在三组中最大;AKI患者行CRRT治疗前、后BIVA参数变化值介于健康志愿者及血透患者之间;(2)CRRT或普通血透患者,透析前后两次BIVA检测之间的净出入量与OH变化值比较接近,改变方向一致,差异均无统计学意义;(3)体重改变与BIVA参数改变的相关性:普通血透患者体重改变与TBW、ECW及OH改变相关性最强,CRRT患者的体重改变与TBW,ECW,OH的变化仍有很好的相关性(P<0.05)。无论是慢性透析还是AKI-CRRT,体重改变与ICW相关性不好(P>0.05)。结论:在AKI并行CRRT的患者中检测透析前后两次BIVA参数,与体重变化值及期间净出入量变化值变化方向一致,相关性良好,提示在AKI-CRRT患者中可应用BIVA检测以评估其液体负荷的变化,指导容量管理。
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