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我国烟草植物的种植面积和产量均居世界首位。烟草中含有绿原酸、烟碱和茄尼醇等多种生物活性成分,可以采用一系列的技术工艺,对其进行提取、纯化,从而应用于农业、医药、食品、化工等行业。绿原酸具有抗菌、抗病毒、升高白细胞、保肝利胆和兴奋中枢神经系统等多种药理作用。本论文对烟草绿原酸的提取分离纯化工艺进行了系统地研究,主要内容如下:1.建立了测定绿原酸的纸层析-紫外分光光度法(PC-UV)和高效液相色谱法(HPLC)。两种方法对样品重复测定的变异系数分别为1.54 %和1.23 %,平均加标回收率分别为100.71 %和100.46 %,说明两种方法都准确可靠。采用高效液相色谱法时,色谱柱为Hypersil BD-C18 250mm×4.6 mm i.d,流动相为25 %乙腈+0.5 %乙酸,流速为1 mL/min,检测波长为326 nm,测得烤烟C1F中绿原酸含量为3.320 %。2.研究了超声波辅助提取法提取烟草主要活性成分的工艺,并与热回流提取法进行了比较。超声波辅助提取绿原酸的最佳工艺条件为:pH 4的95 %乙醇,料液比1:15,提取温度80℃,提取两次,每次45 min。所得烟草提取物A的固形物得率为21.18 %,其中绿原酸含量13.93 %,提取率93.65 %,结果明显优于热回流法。3.进行了大孔吸附树脂分离富集提取物A中绿原酸的性能研究。通过静态吸附-解吸实验,从8种大孔吸附树脂中筛选出LSA-8B、XDA-1和LSA-21三种较佳的树脂,通过吸附动力学实验,从中确定出XDA-1树脂最适合烟草绿原酸的富集分离。XDA-1树脂吸附分离烟草绿原酸的工艺条件为:吸附液中绿原酸的浓度3.5 mg/mL, pH 3.0,流速2 BV/h,以6 BV的40 %乙醇洗脱,解吸附效果最佳。得到的绿原酸粗品B中绿原酸含量为39.20 g/100g,回收率为80.06%。4.采用乙酸乙酯萃取对绿原酸粗品B进行进一步富集分离研究。最佳萃取条件为:料液初始绿原酸浓度12 mg/mL左右, pH 2.0,1:1萃取三次。得到了绿原酸产品C,其纯度达到64.53 g/100g,得率为82.58 %。5.研究了聚酰胺柱层析纯化绿原酸产品C的工艺。最佳的工艺条件为:先利用80～100目聚酰胺柱(φ30×500),上柱样液浓度在10 mg/mL左右,4 BV的20 %乙醇洗脱,得到绿原酸产品纯度为86.71 %,得率为60.41 %;再采用150～200目聚酰胺柱(φ30×500)进一步纯化,得到最终绿原酸产品D,纯度达到92.73 %,得率为59.28 %。6.采用熔点测定、纸色谱、紫外光谱、红外光谱、高压液相色谱和LC-MS对绿原酸产品D进行了鉴定。