1.研究背景哮喘是以炎症、气道高反应性和气道重塑为主要病理生理特点的慢性气道炎症性疾患。哮喘的发病受遗传易感性和环境因素的共同影响。近年来,有关哮喘发病机制的研究取得了很大的进展。哮喘的治疗手段在不断的进步,治疗水平也不断提升。但是,随着环境污染的不断加剧,哮喘的发病率和病死率却呈现不断上升的趋势。同时,伴随着哮喘发病率的不断升高,在手术病人中哮喘患者所占的比例也相应地增多。七氟醚是临床麻醉工作中最常用的吸入麻醉剂之一。近几年,国内外均有病例报道,七氟醚能成功地用于常规治疗药物无效的重症哮喘患者,尤其是婴幼儿重症哮喘持续状态。大量的临床和动物实验表明,七氟醚能舒张支气管平滑肌,缓解支气管痉挛,抑制哮喘个体的气道高反应性,降低哮喘个体的气道阻力。但是,七氟醚治疗重症哮喘、抑制哮喘气道反应性、降低气道阻力的具体机制并不清楚。哮喘气道的高反应性及哮喘持续状态与哮喘气道炎症和气道重塑密切相关。然而,有关七氟醚对哮喘气道炎症和气道重塑方面的研究极少见有报道。本研究拟以OVA(卵清蛋白)诱导的急/慢性哮喘小鼠为研究对象,实验分为两个部分,分别观察七氟醚对哮喘小鼠气道炎症和气道重塑的影响,并初步探讨其可能的分子机制。2.研究目的以OVA致敏和激发的急、慢性哮喘小鼠模型为研究对象,观察七氟醚对哮喘小鼠气道炎症和气道重塑的影响。期望为哮喘患者临床麻醉的管理和麻醉药物的选择提供一定的实验室理论依据。3.研究方法3.1急、慢性哮喘模型的建立C57BL/6雌性小鼠,随机分为:对照组(生理盐水组/Con组),哮喘模型组(OVA致敏和激发组/OVA组),七氟醚干预组(OVA致敏、激发合并七氟醚处理组/OVASVF组),氧气对照组(OVA致敏、激发合并氧气处理组/OVAO2组)。腹腔注射OVA和k Al SO4混合液进行致敏,根据急慢性造模需求的不同进行OVA雾化激发。3.2七氟醚对哮喘小鼠的干预每次OVA雾化激发前,3%七氟醚吸入处理七氟醚干预组小鼠1小时。3.3组织病理学检测观察七氟醚对哮喘小鼠肺组织病理学的影响:包括急性气道炎症和慢性气道重塑。3.4分子生物学检测ELISA、免疫印迹、免疫组织化学方法分别检测七氟醚对哮喘小鼠肺泡灌洗液炎症因子、炎症相关蛋白、气道重塑相关指标表达的影响。3.5统计学分析统计分析使用SPSS13.0统计软件;用one-way ANOVA检测组间差异,用Bonferroni检验进行两两间比较;所有数据均采用均数±标准差表示;P<0.05表示差异有显著性。4.研究结果4.1七氟醚对急性哮喘模型小鼠气道炎症的影响与Con组相比,OVA组小鼠BALF中炎症细胞总数和分类计数均显著增多,TNF-α的含量升高,IL-10与TNF-α比例显著增加(P<0.01),肺组织炎症细胞浸润、气道上皮增生和粘液分泌明显增加(P<0.01);与OVA组相比,OVASVF组小鼠BALF中炎症细胞总数和分类计数均显著减少,TNF-α的含量降低,IL-10与TNF-α比例降低,肺组织炎症细胞浸润明显减少,而OVAO2组小鼠在上述方面均无显著变化。与Con组相比,OVA组小鼠肺泡灌洗液、肺组织HMGB1含量及细胞浆内HMGB1表达均明显升高,肺组织中TLR2表达增多;与OVA组相比,OVASVF组HMGB1、TLR2表达显著下降(P<0.01),而OVAO2组小鼠则无上述变化。4.2七氟醚对慢性哮喘模型小鼠气道重塑的影响与Con组相比,OVA组小鼠肺组织支气管周围、血管周围及肺间质炎症细胞浸润明显增多,气道壁增厚、平滑肌增生、胶原纤维增生及沉积均明显增多;与OVA组相比,OVASVF组小鼠肺组织炎症细胞浸润明显减少,气道壁增厚、平滑肌增生、胶原纤维增生及沉积均减少,而OVAO2组小鼠则无上述明显变化。与Con组相比,OVA组小鼠肺组织中α-SMA、TGF-β、和VEGF的表达增多(P<0.01);与OVA组相比,OVASVF组α-SMA、TGF-β、和VEGF的表达减少(P<0.01),而OVAO2组小鼠则无变化。5.研究结论5.1七氟醚可以抑制急性哮喘模型小鼠的气道炎症,其抑制炎症的作用可能与抑制哮喘小鼠肺组织HMGB1的胞浆表达和TLR2的蛋白表达相关;5.2、七氟醚可以抑制慢性哮喘模型小鼠的气道重塑,其抑制气道重塑的作用可能与降低哮喘小鼠肺组织TGF-β和VEGF的蛋白表达水平相关。