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弥漫性大B细胞淋巴瘤(diffuse large B cell lymphoma,DLBCL)是非霍奇金淋巴瘤(NHL)中最常见类型,占全部NHL患者的30%-40%。具有高度异质性,不同亚型具有不同临床特征、遗传学改变和治疗反应。R-CHOP为基础的联合治疗方案是目前DLBCL的标准方案,使得患者的5年生存期达到60%-70%,约30%-50%的患者会因药物抵抗或疾病迅速复发而死亡。因此,该病目前仍是不可治愈的恶性疾病。肿瘤的发生发展是一个涉及多基因表达异常及转录后调控异常的复杂过程,然而任何生物反应的改变均伴随着能量的变化,因而能量代谢异常在肿瘤发生发展中的作用也越来越受到研究者的重视,目前认为代谢改变是肿瘤的一个新特征,癌细胞通过代谢改变维持其高增殖率。PPA1为无机焦磷酸酶(inorganic pyrophosphatase,PPase)的家族成员之一,通过水解无机焦磷酸盐(PPi)为2分子的正磷酸盐(Pi),同时释放能量,还可以使H~+从胞质泵入膜内,起到质子泵的作用。同时在特定条件下可作为能量供体和ATP替代物,在细胞生长发育中也具有重要作用。目前关于PPA1与肿瘤的相关研究提示其在多种实体肿瘤中高表达,这与PPA1能够满足恶性肿瘤快速生长、异常分化过程中能量供给需求增加相关。然而PPA1在血液肿瘤尤其是高度异质性的DLBCL中的作用尚未见报道。本课题旨在探讨PPA1在弥漫性大B细胞淋巴瘤的表达及其表达与临床特征之间的相关性,并通过体内外实验探讨PPA1对弥漫性大B细胞淋巴瘤细胞增殖及凋亡的影响及可能机制,为PPA1能否成为弥漫性大B细胞淋巴瘤新的检测指标用于早期诊断、预后判断及治疗靶点的选择。我们首先采用免疫组化的方法检测了65例DLBCL患者和20例反应性淋巴结增生的患者中PPA1的表达情况。结果显示PPA1在DLBCL患者的表达明显高于对照组(p<0.05),其高表达与患者B症状和IPI评分相关(p<0.05)。接着,分别采用Real-time PCR和Western blot法检测了PPA1在DLBCL细胞系及正常人永生B淋巴细胞中的表达,结果显示,与对照组相比,PPA1在大部分DLBCL细胞系中高表达(p<0.05),PPA1蛋白水平在DLBCL中均明显增高(p<0.05)。然后,我们采用RNA干扰技术研究了PPA1基因沉默后对DLBCL细胞系增殖和凋亡的影响。结果显示沉默PPA1后DLBCL细胞增殖能力减低,凋亡明显增加(p<0.05)。进一步的机制探讨中我们发现沉默PPA1后DLBCL中P53和P21表达量明显增加,可能机制为通过调节JNK-P53通路来影响细胞增殖。同时发现沉默PPA1后caspase3剪切体表达量明显增加,提示PPA1可能通过下调caspase3剪切体进而抑制细胞调亡过程的。总之,本研究揭示PPA1在DLBCL发生发展中具有重要意义,为其成为新的靶标用于疾病早期诊断、预后分层及治疗提供了理论依据。