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目的:探讨TAP对实验性糖尿病大鼠周围神经和主动脉的保护作用及其机制。
方法:(1)一次性给大鼠链脲佐菌素(STZ)(60mg·kg-1,ip)制作糖尿病大鼠模型,72h后若血糖值≥16.7mM者则纳入糖尿病大鼠,造模大鼠按血糖值范围分为模型组、TAP组(390,195,97.5 mg.kg-1,ig),T组(195 mg·kg-1,ig),P组(195mg·kg-1,ig)和导升明组(100 mg·kg-1,ig),另设一正常对照组,连续灌胃给药24w。给药期间每4w检测一次血糖、体重,于16w,20w,24w时用代谢笼检测糖尿病大鼠24h饮食、饮水及尿量。(2)给药24w后,检测各组糖尿病大鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽还原酶(GStt-Px)含量,血脂、糖化血清蛋白(GSP)、一氧化氮(NO)及尿白蛋白(UALB)水平;(3)给药24w后,检测右侧坐骨神经传导速度(NCV),光镜(HE、甲苯胺篮)观察坐骨神经形态的改变,并以病理图像分析软件计算髓鞘面积及密度,电镜观察坐骨神经超微结构的改变,免疫组化法观察坐骨神经内VEGF和NGF的表达情况,并以病理图像分析软件计算阳性细胞数及阳性细胞强度;(4)给药24w后,光镜和电镜观察主动脉病理学及超微结构改变,免疫组化法检测主动脉VEGF蛋白表达水平,病理图像分析软件计算其阳性细胞数及阳性细胞强度。
结果:(1)TAP组均能明显降低糖尿病大鼠血糖、饮食、饮水及尿量,增加体重,与模型组相比有显著性意义(P<0.05),其中TAP大剂量组效果最明显;(2)TAP各组均可降低DM大鼠血清MDA、TC、TG、LDL-C及GSP水平,提高血清SOD、GSH-Px、HDL-C、NO水平,以TAP大剂量组效果最好;(3)通过电镜、电生理、免疫细胞化学检测表明TAP有改善坐骨神经髓鞘及轴突的损伤,提高坐骨神经的传导速度(NCV)和上调VEGF及NGF的表达(P<0.05),其中以大剂量组效果更明显(P<0.01);(4)TAP对大血管有明显保护作用,光电镜观察到模型组内皮细胞有脱落,内皮下有平滑肌迁入,中膜平滑肌排列紊乱,而用药组血管内膜平整,内皮下间隙小,中膜平滑肌细胞排列较整齐。免疫组化结果显示,血管内皮细胞及平滑肌细胞的VEGF表达均减少(P<0.05),其中以TAP大剂量组效果最佳。两个单味药也有一定作用,但效果不及TAP大剂量组。
结论:1.TAP对糖尿病大鼠“三多一少”症状有明显改善作用。
2.TAP能明显降低糖尿病大鼠血糖、改善血脂,提高机体的抗氧化能力。
3.TAP对实验性糖尿病大鼠周围神经和大血管有较好保护作用。
4.复方TAP的效果要比单味药T和P效果更明显。