Th17细胞在胃癌患者体内的分布及其调节机制研究

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目的:检测胃癌患者Th17细胞分布,分析胃癌肿瘤微环境Th17细胞募集的机制,并探讨Th17细胞促进胃癌进展的可能机制,为开展有效的胃癌免疫细胞治疗提供实验和理论依据。方法:1采用流式细胞分析技术,检测胃癌患者外周血中Th17细胞占淋巴细胞比例,分析胃癌患者外周血Th17细胞的分布特征。2采用实时荧光定量RT-PCR法,检测胃癌组织与非癌对照组织、胃癌肿瘤区域引流淋巴结与非肿瘤区域淋巴结中IL-17和趋化因子(CCL1、CCL2、CCL7、CCL17、CCL20、CCL22、CXCL2、CXCL5、IL-8)的mRNA表达情况。3采用免疫组织化学染色法,检测胃癌组织与非癌对照组织中血管内皮特异性抗原CD34和中性粒细胞特异性抗原CD66b的表达。结果:1与健康对照组相比,胃癌患者外周血Th17细胞占淋巴细胞比例显著升高(1.913±0.702%vs.0.402±0.022%,P<0.05)。2实时荧光定量RT-PCR结果显示:与非癌对照组织相比,胃癌组织中IL-17和趋化因子CCL2、CCL7、CCL20、CCL22mRNA表达显著增高(P<0.05或P<0.01);而趋化因子CCL17、CXCL2和CXCL5mRNA表达在两者之间无明显变化。与非肿瘤区域淋巴结相比,胃癌肿瘤区域引流淋巴结中IL-17和趋化因子CCL2、CCL7、CXCL5mRNA表达显著增高(P<0.05);而趋化因子CCL17、CCL20、CCL22和CXCL2mRNA表达在两者之间无明显变化。3胃癌组织和肿瘤区域引流淋巴结中,IL-17mRNA表达与趋化因子mRNA表达相关性分析,结果发现:胃癌组织中IL-17mRNA表达水平与趋化因子CCL20、CCL22mRNA表达水平明显相关(P<0.05);而IL-17mRNA表达水平与趋化因子CCL2、CCL7mRNA表达水平无明显相关性(P>0.05)。肿瘤区域引流淋巴结中IL-17mRNA表达水平与CCL2、CCL7mRNA表达水平无明显相关性(P>0.05)。4.胃癌组织IL-17mRNA表达与胃癌患者临床病理参数之间的相关性分析显示:胃癌组织IL-17mRNA表达水平与患者TNM分期相关(P<0.05),而与患者的性别、年龄、肿瘤分化程度、淋巴结转移、肿瘤大小、血管浸润无关(P>0.05)。5.依据IL-17mRNA表达中位数,将胃癌组织标本分为两组,IL-17高表达组与IL-17低表达组,免疫组化结果显示,IL-17高表达组CD34阳性细胞数量显著高于IL-17低表达组。同样,IL-17高表达组CD66b阳性细胞密度显著高于IL-17低表达组。结论:1胃癌患者外周血和组织内Th17细胞表达显著增高,胃癌组织微环境中Th17细胞聚集可能与趋化因子CCL20、CCL22表达升高,诱导Th17细胞由外周向肿瘤组织募集有关。2胃癌组织Th17细胞聚集,并通过诱导新生血管生成和中性粒细胞浸润促进胃癌进展。
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