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目的:通过对青翘、老翘中主要活性成分总黄酮含量、连翘苷含量、连翘酯苷A含量、芦丁含量和槲皮素含量进行测定,比较两者之间的差异,为规范青翘和老翘在制药、保健及其临床等方面的应用提供实验依据。通过对青翘正丁醇部位化学成分及体外活性研究,筛选更多的活性成分,为青翘中活性成分的进一步深入开发利用提供参考。方法:本课题采用UV法测定青翘、老翘中总黄酮的含量,其中显色剂为5%三氯化铝甲醇溶液,对照品为芦丁;采用HPLC对青翘、老翘中连翘苷、连翘酯苷A、芦丁和槲皮素的含量进行测定,该方法稳定、可行。采用正相硅胶柱层析、重结晶、制备薄层及制备液相等技术对青翘正丁醇部位进行分离纯化,采用化学及波谱学的方法对所分离得到的单体化合物进行结构鉴定;采用K-B纸片扩散法测定青翘正丁醇部位活性成分对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌三种细菌的抑菌效果;采用DPPH法测定青翘正丁醇部位活性成分清除DPPH自由基的能力。结果:化学成分对比研究中实验结果显示:青翘中总黄酮含量为1.362%、连翘苷含量为29.95±0.06 mg/g、连翘酯苷A含量为64.0325±0.03 mg/g,芦丁含量为2.6075±0.02 mg/g,槲皮素含量几乎为0 mg/g;老翘中总黄酮含量为1.099%、连翘苷含量为22.975±0.04 mg/g、连翘酯苷A含量为58.3325±0.03 mg/g,芦丁含量为0.57075±0.01 mg/g,槲皮素含量为0.0209±0.07 mg/g;青翘正丁醇部位分离纯化结果显示:共得到3个单体化合物,分别为FrD-1、FrD-2、FrD-3,经鉴定FrD-1为连翘苷、FrD-3为连翘酯苷A,FrD-2为齐墩果酸;青翘正丁醇部位抑菌活性研究结果显示:连翘酯苷A对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌及肺炎链球菌抑菌圈直径大小分别为12.35、9.58、12.29 mm;连翘苷对三种菌几乎没有抑制作用;正丁醇部位浸膏对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌及肺炎链球菌抑菌圈直径大小分别为9.87、7.44、7.55 mm;齐墩果酸对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌及肺炎链球菌抑菌圈直径大小分别为6.30、0、7.22mm。青翘正丁醇部位抗氧化实验结果显示:连翘酯苷A和正丁醇部分浸膏清除DPPH自由基的活性较高,约为抗坏血酸的85%和63%,连翘苷清除DPPH自由基的活性较低,仅为抗坏血酸的0.45%。结论:青翘、老翘化学成分对比研究实验结果表明青翘中总黄酮的含量、连翘酯苷A、连翘苷、芦丁的含量均高于老翘,而槲皮素的含量低于老翘。青翘正丁醇部位分离纯化的实验中共得到了3个单体化合物,分别为:连翘苷、连翘酯苷A和齐墩果酸,且所得到的连翘苷含量较连翘酯苷A的含量少,这与第一部分含量测定结果相吻合。青翘正丁醇部位抑菌实验结果表明连翘酯苷A的抑菌活性最强,其次为齐墩果酸,连翘苷的抑菌活性最弱,且连翘酯苷A对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌及肺炎链球菌的抑制强弱为:大肠杆菌﹥金黄色葡萄球菌﹥肺炎链球菌;正丁醇部位清除DPPH自由基活性实验结果表明连翘酯苷A和正丁醇部位浸膏清除DPPH自由基的活性较高,连翘苷清除DPPH自由基的活性较低。体外抑菌试验和抗氧化实验结果显示连翘酯苷A的活性均强于连翘苷。