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目的：糖尿病（diabetes mellitus, DM）大血管并发症包括高血压、冠心病、脑血管疾病及周围血管疾病，是糖尿病患者死亡的首要原因。大血管病变的主要病理基础是动脉粥样硬化（atherosclerosis, AS），炎症及血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells, VSMCs）的增殖在动脉粥样硬化发展过程中起着关键作用。白藜芦醇（resveratrol, Res）是一种自然界中少量存在的非黄酮多酚类化合物，富含于葡萄、虎杖、松树等多种植物中，是植物在应激状态下产生的一种强抗氧化剂，具有抗氧化与抗自由基、抗炎、调节免疫、心血管保护作用、调脂、降低血糖、改善胰岛素抵抗、抗肿瘤及雌激素样活性等广泛的生物学和药理学作用。白藜芦醇可以通过抗氧化、抗炎症反应、抑制VSMCs增殖等作用，防止动脉粥样硬化的发生。核因子-κB(nuclear factor-kappaB, NF-κB)是一种转录因子，存在于单核细胞、血管平滑肌细胞及血管内皮细胞中，在动脉粥样硬化的发生发展过程中起着关键性作用。单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractantprotein-1, MCP-1)，血管细胞粘附分子-1(vascular cell adhesion molecule-1,VCAM-1)，均是NF-κB通路上的下游因子。NF-κB的激活及各种损伤性刺激可以通过NF-κB信号转导途径，诱导MCP-1与VCAM-1的表达，促进外周血白细胞-单核细胞黏附、趋化并迁移至内皮下，吞噬脂质转化为泡沫细胞，促进VSMCs增殖，参与AS的发生和发展。本实验通过不同葡萄糖浓度培养大鼠胸主动脉VSMCs，观察VSMCs增殖以及NF-κB、MCP-1、VCAM-1的水平变化，同时应用白藜芦醇和PI3K特异性抑制剂LY294002进行干预，观察白藜芦醇对VSMCs增殖的影响，探讨白藜芦醇的抗AS作用的可能机制，为白藜芦醇的临床应用提供实验室依据。实验方法：1细胞培养：以大鼠胸主动脉平滑肌细胞株A7r5(细胞株购自中国培养物典藏中心)为研究对象。将血管平滑肌细胞株接种于培养瓶中，放于37℃、5%CO2孵箱中孵育，待细胞铺满瓶底的90%后进行传代。取处于对数生长期的细胞分别接种于50ml培养瓶和96孔培养板培养48小时，后更换于无血清DMEM培养基培养24小时，使细胞生长同步化，然后分组进行实验：①正常对照组（NG组，含5.5mmol/L葡萄糖）②高糖培养组（HG组，含25mmol/L葡萄糖）③NG+抑制剂LY294002组（10、20、30μmol/L）④HG+抑制剂LY294002组（10、20、30μmol/L）⑤NG+白藜芦醇Res组（25、50、100μmol/L）⑥HG+白藜芦醇Res组（25、50、100μmol/L）2取处于对数生长期的细胞，用MTT法检测各组VSMCs的增殖活力。3取处于对数生长期的细胞，用ELISA法测定各组细胞上清液中MCP-1、VCAM-1的水平。4取处于对数生长期的细胞，应用Western blot技术检测各组VSMCs的NF-κB、p-Akt、Akt蛋白表达。结果：1在高糖诱导下，VSMCs增殖活力显著增加，明显高于正常葡萄糖组（P＜0.05）；Res（25、50、100μmol/L）以及抑制剂LY294002（10、20、30μmol/L）可明显抑制高糖诱导的VSMCs增殖（P＜0.05）；2高糖孵育组MCP-1和VCAM-1的表达水平明显高于正常葡萄糖组（P＜0.05）；Res（25、50、100μmol/L）以及抑制剂LY294002（10、20、30μmol/L）可显著抑制高糖诱导的MCP-1和VCAM-1的表达（P＜0.05），且呈剂量依赖性；3Western blot技术检测结果显示：⑴高糖能使磷酸化的Akt蛋白表达及NF-κB蛋白表达明显增加，高于正常葡萄糖组（P＜0.05），但高糖组总的Akt与正常葡萄糖组比较，无统计学差异（P＞0.05）；⑵用不同浓度的LY294002处理高糖孵育的VSMCs后，Akt的磷酸化受到抑制，p-Akt蛋白表达减少（P＜0.05）；用不同浓度的Res（25、50、100μmol/L）处理高糖孵育的VSMCs，也可显著降低p-Akt蛋白的表达，且呈浓度依赖性（P＜0.05）；⑶用不同浓度LY294002处理VSMCs后，总的Akt蛋白水平无明显升高，与正常对照组比较，无显著差异（P＞0.05），用不同浓度Res处理高糖孵育的VSMCs，能显著降低总的Akt的蛋白水平，但无剂量依赖性；⑷用不同浓度的LY294002处理高糖孵育的VSMCs，可见NF-κB的高表达受到抑制（P＜0.05），且抑制作用具有剂量依赖性；不同浓度的Res（25、50、100μmol/L）处理高糖孵育的VSMCs，同样可以抑制NF-κB的表达，NF-κB水平明显低于高糖组（P＜0.05），而且具有剂量依赖性。结论：1高糖可以增加VSMCs的增殖活力；2高糖诱导VSMCs的增殖与激活PI3K/Akt信号通路，诱导血管平滑肌细胞NF-κB和MCP-1、VCAM-1表达有关；3白藜芦醇可以抑制VSMCs的增殖。白藜芦醇通过抑制高糖诱导的PI3K/Akt信号通路的激活，抑制炎症因子NF-κB表达，进而抑制MCP-1、VCAM-1的表达，达到抑制VSMCs增殖的作用。