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沙门菌(Salmonella)和大肠杆菌O157:H7(Escherichia coli O157:H7,E.coli O157:H7)是对人类健康有严重危害的重要食源性致病菌,建立其高效、快速检测方法具有重要意义。动态光散射(Dynamic light scattering,DLS)技术作为一种常规纳米颗粒分析方法,具有检测灵敏、成本低、免分离、易操作、数据易处理等优点得到越来越多研究者的关注。本研究以上述两种目标菌DNA合成了对应的金纳米粒子(Gold nanoparticles,AuNPs)探针实现了对目标DNA的高效捕获,结合DLS技术实现了牛奶中两种目标菌快速、灵敏的检测。为了进一步实现对实际样本的检测,本研究在传统的食品快速检测车基础上进行多方面改造并设计了一种新型的食品安全检测车方案,以期为食品安全提供即时、现场的检测平台。各章节内容分述如下:第一章综述了AuNPs-DLS在目标物快速灵敏检测的研究进展及食品安全检测车在基层食品安全保障的应用进展。第二章建立了常规碱基互补配对介导的AuNPs-DLS技术用于快速检测牛奶中Salmonella的方法。该方法所用的探针和引物根据Salmonella的invA设计而来的。通过不对称PCR(Asymmetric PCR,aPCR)合成单链DNA(Single-stranded DNA,ssDNA)。当存在目标ssDNA时,AuNPs探针通过碱基互补配对原则捕获目标ssDNA使自身发生聚集,其水化粒径明显变大;相反,若反应体系中不存在目标物时,其AuNPs探针处于相对分散状态,其水化粒径基本保持不变。根据检测体系AuNPs水化粒径变化即可实现对Salmonella的检测。在最佳反应参数下,该方法对牛奶中Salmonella的检测限为2.6×10~1CFU/mL。对牛奶中10~1~10~6 CFU/mL目标菌进行检测时,回收率在92.9%~102.6%之间,其检测方法特异性也较好。第三章建立了基于“三链体”DNA特殊结构介导的AuNPs-DLS技术用于快速检测牛奶中E.coli O157:H7方法。该方法首先通过对称PCR制备大量E.coli O157:H7双链DNA(Double-stranded,ds DNA),相比aPCR制备ss DNA,其制备效率大大提高。通过胡斯坦碱基互补配对原则,AuNPs探针与目标dsDNA形成“三链体”DNA结构发生聚集;而不存在目标dsDNA情况下,其AuNPs探针保持分散状态,利用DLS技术测定反应体系中AuNPs水化粒径变化即可实现对E.coli O157:H7的检测。在最佳反应条件下,该方法用于E.coli O157:H7的检测,其最低检测限为10~1 CFU/mL,通过验证,其特异性也较好。第四章初步完成了一种新型食品安全检测车设备的设计方案。设计思路为:在现有车辆基本性能上进行改造,严格按照实验室标准化要求,最终实现对各类基层食品采样、检测、数据处理等过程,充分体现该设备的高机动性、高适用性。本设计重点对食品安全检测车主要功能单元如车辆基础设施、实验操作区、样品及废弃物储藏、水电气设施、数据处理设施等进行论述,使其符合快速精确、经济适用的检测要求,为保障基层食品安全提供一种有利的检测平台。