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枯草芽孢杆菌(Basillus subtilis)可以产生内生芽孢,抗逆性强,能够防治多种植物病害,如棉花黄萎病,水稻稻瘟病,小麦全蚀病,烟草青枯病等。在防治病害的同时,许多菌株具有促进生长和增产的作用,同时对环境和动物安全。张志元从广东梅州、重庆北碚、湖南石门采集柑、橙、柚健康植株的枝条分离内生细菌,从中筛选到对油菜菌核菌具有拮抗作用的内生细菌分离物,并将抑菌活性最强的分离物YS-45鉴定为枯草芽孢杆菌(Basillus subtilis)。本文研究了YS-45菌株的生物学特性,通过培育油菜无菌苗和盆栽苗,用浸根接种方法研究了YS-45菌株在芽期无菌苗和苗期盆栽苗油菜内定殖,研究芽期无菌苗和苗期盆栽苗对油菜菌核病的防治效果,主要结果如下:1.通过种子带菌率调查和种子带菌量的调查,油菜种子内生菌带率高,不宜直接供作无菌苗培养,而应该选用带菌率低和带菌数少的油菜品种,再辅助浓度为1000mg/l地无菌-1‰升汞外植体杀菌消毒剂来培育无菌苗。实验结果证明,油菜种子内生菌带菌率除M004较低只有30.0%外,其它品种都高达55.0%～85.0%;M004种子带菌量为1.5×10~5cfu/g也是最少的,最多的98C04为6.0×10~5 cfu/g。2.YS-45菌株生长特性研究结果表明该菌株最适生长pH值为7.0;最适生长温度为30℃;在20W紫外灯不同时间照射下生长逐步减缓;随着培养时间的延长,总菌数持续的增加,36h后趋于稳定,而活菌数在36h时达到峰值,之后则大幅度减少,所以YS-45菌株在24h～36h内处于稳定的生长期。3.为研究定殖,对YS-45菌株进行了抗卡那霉素突变筛选。筛选出在70μg/ml卡那霉素中能稳定生长的突变菌株,且菌落形态和对油菜菌核菌的拮抗作用保持不变,并通过抗生素的标记,判断定殖能力。结果表明:以1.2×10~9 cfu/ml浓度的YS-45抗药菌悬浮液灌根就能侵入定殖油菜无菌苗,无菌苗带菌数为1.3×10~5 cfu/g。4.定殖YS-45的盆栽苗比定殖YS-45的无菌苗的抗菌核病效果更好。芽期定殖YS-45的无菌苗接种油菜菌核病后发病率和病情指数只有76.1%和47.4,而对照的发病率和病情指数则分别是95.7%和80.6,定殖YS-45的无菌苗的防治效果为41.2%,发病较轻;苗期定殖1.2×10~9 cfu/ml浓度YS-45的盆栽苗发病率和病情指数最低,仅有61.4%和16.3,定殖0.6×10~9 cfu/ml浓度YS-45的盆栽苗发病率和病情指数次之,对照发病率和病情指数最高为84.7%和44.2,定殖1.2×10~9 cfu/ml浓度YS-45的盆栽苗和定殖0.6×10~9 cfu/ml浓度YS-45的盆栽苗的防治效果分别为63.0%和54.3%,发病也较轻。枯草芽孢杆菌YS-45对油菜菌核菌具有较强的抑制活性,并能从根部进入油菜植株内定殖,因此它是一种理想的生防菌。