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目的观察不同温度艾灸对小鼠穴位局部皮肤线粒体呼吸链复合物活性的影响,及SIRT1、SIRT3蛋白表达含量的变化,部分揭示艾灸温热刺激在穴位局部皮肤中的能量转换机制。方法健康3月龄C57BL/6J野生型小鼠共60只,随机分为空白组、38℃-30 min组、38℃-72 h组、46℃-30 min组、46℃-72 h组,每组12只。艾灸组分别采用38℃和46℃艾灸小鼠“足三里”穴30 min,空白组只捆绑不艾灸,分别于灸后30 min和72 h取穴位局部皮肤组织,提取皮肤中的线粒体,采用分光光度法,测定线粒体呼吸链复合体I~V活性;采用免疫荧光技术(Immunofluorescence,IF)和蛋白免疫印迹法(Western Blot,WB)检测穴位局部皮肤SIRT1、SIRT3蛋白表达水平。结果1不同温度艾灸对穴位局部皮肤线粒体呼吸链复合物I~V活性的影响灸后30 min时,与空白组相比,艾灸组(38℃和46℃)穴位局部皮肤线粒体呼吸链复合物I~V活性表达,其中38℃-灸组增加更明显(与其它各组相比均有统计学差异,P<0.05),46℃-灸组也有增加,但与空白组相比无统计学意义(P>0.05),且显著低于38℃-灸组(P<0.05)。灸后72 h时,艾灸组穴位局部皮肤线粒体呼吸链复合物I~V活性与灸后30 min相比均有所下降,但仍略高于空白组,其中38℃-灸组仍高于46℃-灸组,但两组之间无统计学差异(P>0.05)。2不同温度艾灸对穴位皮肤SIRT 1、SIRT3蛋白表达的影响免疫荧光检测结果显示,灸后30 min,与空白组相比,艾灸组穴位局部皮肤SIRT1、SIRT3的阳性表达均有增强,其中46℃-灸组增加更明显(与其它各组相比有统计学差异,P<0.05),38℃-灸组也有增加,但与空白组相比无统计学意义(P>0.05),且显著低于46℃-灸组(P<0.05)。灸后72 h,艾灸组穴位局部皮肤SIRT1、SIRT3阳性表达仍处于较高水平,且高于灸后30 min,但无统计学差异(P>0.05)。其中46℃-灸组仍高于38℃-灸组,且两组有统计学差异(P<0.05)。蛋白免疫印迹法检测结果显示,灸后30 min,与空白组相比,艾灸组穴位局部皮肤SIRT1、SIRT3蛋白表达均有升高,其中46℃-灸组增加更明显(与其它各组相比,P<0.05),38℃-灸组也有增加,但与空白组相比无统计学意义(P>0.05),且显著低于46℃-灸组。灸后72 h,艾灸组穴位局部皮肤SIRT1、SIRT3蛋白表达仍处于较高水平,且高于灸后30 min,但无统计学差异(P>0.05)。其中46℃-灸组仍高于38℃-灸组,且两组之间有统计学差异(P<0.05)。结论1穴位局部皮肤组织线粒体呼吸链复合酶和SIRT1、SIRT3蛋白参与了艾灸温热刺激能量代谢或转换的初始过程。2不同灸温能量转换的具体机制有所不同,38℃对穴位局部皮肤线粒体呼吸链复合物I~V活性影响更显著,46℃对穴位局部皮肤SIRT1、SIRT3蛋白表达影响更显著。3艾灸后30 min对穴位局部皮肤线粒体呼吸链复合物I~V活性影响更明显,而SIRT1、SIRT3蛋白表达在灸后72 h更显著。