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由于腹腔镜手术创伤小、痛苦少、恢复快、术后并发症少等优点，被广泛运用于妇科多种疾病的诊疗，尤其是近年来应用于恶性肿瘤治疗取得了理想的结果。但是，近期的临床观察发现腹腔镜用于恶性肿瘤手术时，术后切口转移和腹腔肿瘤播散率高于开腹手术，为此人们进行了深入的研究，发现除了与脱落肿瘤细胞直接种植、Trocar切口损伤以及CO2沿Trocar的泄露、气体的雾化作用、气体种类的选择以及细胞免疫影响外，作为人工气腹常用CO2气体可能是另一关键因素。迄今，CO2气体对肿瘤细胞的生物学行为有何影响，其机制如何，仍然不清楚且争议较大。因此，我们设计了模拟CO2人工气腹环境，对子宫内膜癌细胞行体外培养以及裸鼠体内移植后肿瘤细胞的生物学特性影响进行实验研究，以探讨CO2人工气腹对子宫内膜癌细胞的可能作用及其机制。一、CO2环境对人子宫内膜癌细胞体外生物学行为影响的实验研究目的：研究CO2人工气腹不同灌注压对人子宫内膜癌细胞株（HEC-1-B）体外生物学特性影响。方法：1．细胞处理: 将处于对数生长期的细胞，经消化、计数、离心后调整细胞为所需浓度。2．分组：（1）对照组：培养瓶直接放入37oC、5%CO2孵箱中孵育4小时；（2）6mmHg组：培养瓶中通入6mmHg、100%CO2气体于37oC 环境4小时；（3）12mmHg组：培养瓶中通入12mmHg、100%CO2气体于37oC 环境4小时。3．指标检测（1） pH值测定：分别于即刻、第1-9天测定各组pH值。（2） Lowry基本法测定细胞内蛋白质含量（1-8天）；（3） 3H-TdR掺入实验（1-12天）评估细胞内DNA合成情况；（4）流式细胞仪分析细胞周期中S期DNA含量（1、3、5、7、9天）。结果：1. pH值：即刻、1天和6-9天显著下降pH值显著下降（P<0.001、P<0.05和 P<0.05），pH与压力呈负相关关系；2-5天pH值显著升高（P<0.01），pH与压力呈正<WP=8>相关关系。2. Lowry基本法测定：实验2组的蛋白含量在开始的1-4天显著低于对照组， P<0.05。于第5天开始蛋白增加幅度显著增加。至第6天，蛋白含量显著高于对照组，P<0.001。呈现压力依赖性。3. 3H-TdR掺入实验：在1-4天，与对照组比较，肿瘤细胞增殖显著减少 （P<0.01），实验组之间也有显著差异（P<0.01），表明压力的依赖性。从5-12天，与对照组比较，肿瘤细胞增殖显著增加（P<0.05）。除了第5天外（P=0.065），各实验组之间有显著差异 （P<0.05）。4. 流式细胞仪细胞周期分析：在前5天，S期的DNA含量较低，自第5天肿瘤细胞S期DNA含量开始增加，在第7天和第9天，S期的DNA含量高于对照组，细胞处于增殖状态，有压力依赖性。结论：短暂的生长抑制后，CO2环境刺激子宫内膜癌细胞的生长。细胞增殖依赖于气体灌注压。二、CO2人工气腹对人子宫内膜癌细胞裸鼠体内生物学行为影响的研究目的：观察CO2人工气腹术对人子宫内膜癌细胞裸鼠腹腔内肿瘤种植、播散和穿刺点转移情况以及探讨增殖细胞核抗原（PCNA）和诱导型一氧化氮合酶（iNOS）蛋表达在影响腹腔内肿瘤种植、播散和穿刺点转移的意义。方法：1．分组:（1）气腹组（15只）：经腹腔内灌注CO2气体形成4mmHg的腹腔压力，建立人工气腹5分钟后，右下腹腔注射肿瘤细胞。40分钟后排出气体。（2）开腹组（15只）：进腹后将小肠和盲肠外置腹腔5分钟放回腹腔并在右下腹腔注射肿瘤细胞,40分钟后，常规关腹。2．麻醉：应用1%异戊巴比妥钠腹腔注射麻醉。3．观察指标：（1） 4周后，观察所有裸鼠体重改变、腹壁穿刺点或切口转移情况，有腹壁转移者测量肿瘤最大直径并称其重。（2） 腹腔内各脏器肿瘤种植、播散情况则运用一个半定量评分系统进行评价、打分。得出每组播散得分情况，并进行组间比较。（3） 对组织标本进行常规光镜、电镜、免疫组化（SP法）检查。4. 免疫组化结果判断：PCNA阳性表达以细胞核内出现明显的棕黄或棕褐色颗粒为阳性细胞，每例随机观察10个高倍视野，每个视野100个细胞中阳性细胞数，取其平均值作为PCNA指数；iNOS蛋白阳性染色表达为胞浆型，按显色强度和阳性细胞<WP=9>所占比例分级。结果：1．开腹组裸鼠体重下降显著高于人工气腹组，分别为（2.42±2.31）g和（0.30±1.72）g，（P<0.05）。2．人工气腹组沿穿刺点肿瘤转移率显著大于开腹组，分别为（86.67%和38.46%），（P<0.05）。3．平均腹壁最大转移肿瘤的直径、重量在人工气腹组显著大于开腹组，分别为（4.93±3.22）mm和（1.77±2.39）mm、（42.29±28.80）mg和（19.22±27.17）mg,（P<0.01和P<0.05）。4．人工气腹组脏器的平均播散得分值显著高于开腹组，分别为（9.80±5.62和3.31±3.12），（P<0.01），其中肝脏、肠管的肿瘤种植、播散得分显著高于开腹组，分别为（4.07±4.23和0.15±0.55、5.40±2.92和2.85±2.61），（P<0.01, P<0.05）。5．人工气腹组的肝转移发生率显著高于开腹组 （66.67%和15.38%）,（P<0.01）。肝脓肿、坏死的发生率开腹组显著高于人工气腹组（69.23%和20.00%），P<0.05。6．PCNA和iNOS蛋白在气腹组比开腹组中的表达均显著增高（P<0.01，P<0.01）。7．气腹组iNOS