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目的:探究深低温冷冻处理对大鼠髌腱组织中肌腱干细胞(tendon-derived stem cells,TDSCs)的细胞存活率、细胞活力、细胞早期凋亡率、细胞迁移能力及肌腱相关基因表达的影响。方法:实验组将6只4月龄SD大鼠的髌腱组织取出,置入含有冷冻保护液的冻存管中,放入冰箱4℃中2小时,-80℃中过夜,投入液氮中保存一星期后取出进行细胞培养。对照组将相同条件的大鼠髌腱组织取出后不作任何处理直接细胞培养。无菌条件下将两组髌腱组织用I型胶原酶(3mg/ml,Sigma)消化获得有核细胞,分别用台盼蓝染色检测有核细胞存活率;结晶紫染色检测有核细胞克隆形成能力;同等条件下将细胞培养到第3代(P3),用Alamar Blue法检测肌腱干细胞体外增殖能力;Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞早期凋亡状态;Transwell法检测细胞迁移能力;实时定量荧光聚合酶链反应(Real-time PCR)检测细胞肌腱相关基因Coll α 1、Scx和Tnmd的mRNA表达。结果:与对照组相比,经深低温冷冻后的髌腱组织来源的有核细胞存活率下降,差异有统计学意义(P<0.05);实验组和对照组原代有核细胞中均有细胞克隆的形成,证实均可成功分离培养鉴定出具有克隆形成能力的肌腱干细胞,但髌腱组织经深低温冷冻后肌腱干细胞数量下降,差异有统计学意义(P<0.05);实验组及对照组肌腱干细胞(P3)培养14天过程中观察到细胞增殖活力相近,差异无统计学意义(P>0.05);同时,实验组和对照组第3代肌腱干细胞早期凋亡率、细胞迁移能力、肌腱分化相关基因表达量相近,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:深低温冷冻使大鼠肌腱组织内有核细胞的存活率降低,但肌腱组织仍保留大量有活性的干细胞。尽管实验组中肌腱干细胞的数量有所下降,但和对照组中肌腱干细胞相比,其细胞增殖能力(P3)、早期凋亡率、体外迁移能力及成肌腱分化能力未见明显异常。研究可为临床应用深低温冷冻保存的同种异体肌腱移植修复肌腱缺损提供相关的理论依据。