【摘 要】
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随着环境污染的增加和水体富营养化,水生生态系统正面临着蓝藻细菌爆发的危机,其中的微囊藻毒素严重威胁着人类以及动植物的健康安危。因此,出于对动物、人类安全的保护以及防治MC对环境的持续迫害问题,设计一套准确、简便的MC-LR毒素定量检测分析系统显得尤为迫切。本文设计了一套新型的纳米组件对MC-LR进行定量分析检测,即:基于氧化石墨烯（GO）的AgClAu空三角纳米片纳米复合结构负载拉曼探针,结合适配
【基金项目】
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国家自然科学基金-上海同步辐射基金（批准号 U1732122,61875255）； 中国科技部和安徽省国际合作研究项目（批准号:2014DFG42290和1704e1002228）； 安徽省环境研究项目（2017-06）；
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随着环境污染的增加和水体富营养化,水生生态系统正面临着蓝藻细菌爆发的危机,其中的微囊藻毒素严重威胁着人类以及动植物的健康安危。因此,出于对动物、人类安全的保护以及防治MC对环境的持续迫害问题,设计一套准确、简便的MC-LR毒素定量检测分析系统显得尤为迫切。本文设计了一套新型的纳米组件对MC-LR进行定量分析检测,即:基于氧化石墨烯（GO）的AgClAu空三角纳米片纳米复合结构负载拉曼探针,结合适配体杂交技术以及链霉亲合素和生物素的特异结合,对MC-LR进行超灵敏的实时定量SERS检测。为了制备该组件,我们构筑了高质量的空心三角形纳米片AgClAu:p-GO（HTNP AgClAu:p-GO）作为模板。将修饰有巯基的适配体cDNA连接在HTNP AgClAu:p-GO上,通过适配体/cDNA杂交与生物素-链霉亲和素特异结合使所有组件组装起来,可将HTNP AgClAu:p-GO组件从皱褶片状调谐到3D网络结构,并同时将拉曼探针加载到组件中。动态组装过程可作为实时SERS传感器,用于超灵敏的检测MC-LR。由于MC-LR/适配体竞争性杂交抑制了cDNA的杂交,进而抑制了GO组件的组装,并导致SERS信号逐渐降低,因此可对MC-LR进行超灵敏检测。本论文设计的HTNP AgClAu:p-GO-适配体传感器,对MC-LR的检测可以达到6.3 pM的检出限,线性范围可从10 pM到5 nM。当aptasensor应用于实际样品时,实时组装/取样方法的回收率从97.5%到103.3%,相对标准差（RSD）低于3.1%,相对理想的结果证明了这种策略的可行性,该策略有望扩展到其他环境污染物的超灵敏测试。本论文针对超灵敏检测MC-LR设计组装的纳米材料新策略具有以下几点重要意义:（I）组装调谐GO有利于将拉曼探针更好的加载到GO中间层,提高SERS稳定性;（II）适配体和MC-LR毒素的比率调节结合有助于调谐GO组装的微纳米结构;（III）一步组装和SERS传感简化了MC-LR毒素的检测过程;（IV）运用DNA-生物素/亲和素技术构筑石墨烯三维材料,这种新的纳米制造方法可以提供对其他目标分析物的高灵敏度和可重复检测。
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