固相微萃取+气相色谱分析在下呼吸道厌氧菌感染诊断中的应用

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目的探索应用SPME+GC技术测定厌氧菌特征性代谢产物挥发性短链脂肪酸(VSCFA),建立快速拟诊下呼吸道厌氧菌感染的方法,并初步制定拟诊厌氧菌感染的SPME+GC检测法诊断标准。方法1.用SPME+GC方法对临床常见的需氧菌和厌氧菌标准菌株培养液作短链脂肪酸的检测,初步拟定SPME+GC检测的诊断标准;2.80例下呼吸道感染患者含漱水和痰标本同步进行SPME+GC对照检测;3.45例下呼吸道感染患者晨痰作SPME+GC,并同时经纤支镜以带特殊保护套细胞刷采集下呼吸道分泌物作厌氧培养以进行对比分析。结果全部厌氧菌株均分别检测出有多种不同的挥发性短链脂肪酸,如乙酸、丙酸、丁酸、异丁酸、戊酸、异戊酸、己酸、异己酸等;而需氧菌则仅个别菌株可检测出微量的乙酸、丙酸,不能检测出其他短链脂肪酸,特别是异丁酸、戊酸、异戊酸。80例患者晨痰、含漱水同步SPME+GC检测中, 51例痰阳性,含漱水全部为阴性。45例患者同步晨痰SPME+GC分析和经纤支镜带特殊保护套细胞刷采集下呼吸道分泌物厌氧培养检查中,厌氧培养阳性者18例,包括此18例在内晨痰SPME+GC阳性者共21例。结论SPME/GC法与厌氧培养法诊断下呼吸道厌氧菌感染具有很高的符合率;异丁酸,丁酸,异戊酸,戊酸,异己酸,己酸等是厌氧菌的特征性代谢产物,以GC清晰检出有丁酸、异丁酸、戊酸其中之一者或除乙酸、丙酸外还检出有其他挥发性短链脂肪酸者作为诊断标准可望获得理想的阳性率和符合率;常规采集的痰样经消化、盐析并超声震荡下SPME/GC拟诊下呼吸道厌氧菌感染,方法简便、快速、灵敏、可靠。
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