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目的:探讨血必净改善凝血功能紊乱的信号机制,旨在为临床防治脓毒症状态下凝血功能障碍提供实验依据。方法:1.随机将内皮细胞分为对照组（0ng/mL LPS）、62.5ng/mL LPS组、125ng/mL LPS组、250ng/mL LPS组、500ng/mL LPS组、1000ng/mL LPS组,培养24、48和72 h后采用CCK-8法检测细胞增殖;留取上清,检测乳酸脱氢酶（lactic dehydrogenase,LDH）释放量,筛选出合适剂量LPS。随后检测不同浓度血必净注射液对LPS刺激内皮细胞增殖能力、释放LDH、组织因子（tissue factor,TF）、血小板活化因子（platelet active factor,PAF）的影响。2.实验分对照组、LPS组、血必净组（1、5、25μl/ml）+LPS组,抑制剂组（50 nmol/L、5nmol/L、0.5nmol/L）+LPS组,培养24、48和72 h后,加入Ca2+、凝血因子（coagulation factor,F）Ⅶ和FⅩ,用发色底物法检测对照组、LPS组、各抑制剂组24h、48h和72h活化FⅩa表达水平,以刺激72 h为观察点,采用Western bⅩlot技术检测对照组、LPS组和血必净（1、5、25μl/ml）+LPS组IRE1α、uXBP1、sXBP1及PDI的表达水平。3.采用盲肠结扎穿孔法（cecal ligation and puncture,CLP）构造大鼠脓毒症模型,分为五组:对照组、假伤组、模型组、血必净组,抑制剂组,每组6只,血必净组术后腹腔注射给予血必净注射液,抑制剂组术后尾静脉注射给予IRE1α抑制剂,分别于术后24h、48h、72h,剪断尾巴测出血时间,经腹主动脉取血测凝血功能,留取上清,测FⅩa表达水平,并取腹主动脉,Western blot检测IRE1α、uXBP1、sXBP1、PDI目的蛋白表达;另构造CLP模型,分组同上,各组20只,检测各组7天存活率。结果:1.不同浓度LPS刺激内皮细胞,模拟脓毒症微环境初步探索:与对照组相比,62.5ng/mL LPS组增殖能力,LDH释放无明显变化（P>0.05）,而125ng/mL LPS组、250ng/mL LPS组、500ng/mL LPS组、1000ng/mL LPS组细胞增殖能力降低,上清中LDH、TF、PAF释放均高于对照组（P<0.05或P<0.01）,其中尤以增殖500ng/ml明显,1000ng/mL LPS组细胞漂浮细胞增多,考虑为死亡细胞。500ng/mL LPS组与其余组比较,增殖活性低于其余组、分泌TF和PAF均高于其余组（P<0.05）。2.不同浓度血必净注射液对内皮细胞的FⅩa和IRE1α表达水平影响:24h时,各组间FⅩa表达无明显差异;48h时,与对照组比较,LPS组FⅩa表达明显升高（P<0.01）,与LPS组比较,LPS+5nmol/L抑制剂组FⅩa降低（P<0.05）;72h时与对照组比较,LPS组FⅩa表达明显升高（P<0.001）,与LPS组比较,LPS+5nmol/L抑制剂组FⅩa明显降低（P<0.01）;与对照组相比,500ng/ml LPS组IRE1α、uXBP1、sXBP1、PDI表达均上调,差异具有统计学意义（P<0.05）;与500ng/ml LPS组比较,各浓度血必净组IRE1α、uXBP1、sXBP1和PDI表达均明显减弱（P<0.01）;FⅩa产生随IRE1α、XBP1、PDI表达水平降低而减少（P<0.05）,其中LPS+5μl/ml血必净组降低FⅩa效果尤为明显（P<0.05）。3.血必净改善脓毒症大鼠凝血功能和生存率的机制研究:凝血功能主要参照血浆凝血酶时间（PT）、活化部分凝血酶原时间（APTT）、血清中FⅩa、大鼠尾巴出血时间四个指标。与对照组比较,假伤组、模型组、抑制剂组和血必净组在24h PT、APTT无明显变化;48h和72h,与对照组比较,假伤组各指标与对照组无明显差异,模型组凝血功能明显异常,与模型组比较,血必净组和抑制剂组PT、APTT、尾巴出血时间缩短,FⅩa水平降低。SAHM组、CLP组、血必净组、抑制剂组7天生存率分别为98.18%、61.77%、90.32%、85.71%,采用Log-rank（Mantel-Cox）Test统计学方法,与CLP组比较,血必净组存活率显著提高（P=0.007,n=20）,抑制剂组存活率提高（P=0.012,n=20）。结论:血必净注射液能通过阻断IRE1α-XBP1通路,降低PDI的表达,影响内皮细胞TF凝血活性,改善脓毒症大鼠凝血功能。