论文部分内容阅读
因烧伤造成的全层皮肤缺损极易引发感染,其治疗仍是临床面临的难题。目前临床上多采用自体移植覆盖缺损部位并配合抗生素解决感染问题。天然生物材料因其良好的生物相容性以及可降解,且来源丰富,可制备具有生物活性的皮肤组织工程支架,而且可以通过在支架上负载抗菌剂解决缺损部位易受到感染的问题。本论文设计制备了两种具有抗菌功能的皮肤支架,作为皮肤组织替代物用于解决烧伤感染问题。一、负载硫酸庆大霉素的胶原/纳米微晶纤维素皮肤支架的研究本体系设计了一种具有抗菌功能的胶原(Coll)/纳米微晶纤维素(CNCs)支架用于创面感染。硫酸庆大霉素(GS)是临床常用的抗菌剂,作为本次的抗菌药物。为了实现长效抗菌,将GS和明胶微球(GMs)复合与胶原/纳米微晶纤维素(Coll-CNCs)三维多孔支架进行冷冻干燥,制备出硫酸庆大霉素/明胶微球/胶原纳米/微晶纤维素复合支架(GS/GMs/Coll-CNCs)并进行相关的体外表征和分析。透射电子显微镜(TEM)显示CNCs的宽度为20-40 nm,长度为150-350 nm,从傅里叶红外光谱(FTIR)可知CNCs保留了微晶纤维素(MCC)的基本化学结构。从扫描电子显微镜(SEM)观察到复合支架的平均孔径约为120μm。体外抗菌实验表明本研究所制备的复合支架对大肠杆菌(E.coli)和金黄色葡萄球菌(S.aureus)抗菌作用显著。细胞毒性结果表明本体系制备的复合支架具有良好的生物相容性。二、负载血根碱的葡聚糖-透明质酸水凝胶皮肤支架的研究水凝胶由亲水性能优异的三维网状聚合物构成,可以及时吸收伤口渗液并且维持湿润的环境,有利于伤口愈合。本体系制备了一种化学交联型的负载血根碱(SA)的抗菌型葡聚糖(Dex)-透明质酸(HA)水凝胶支架用于感染创面。体外实验结果表明,Dex-HA复合水凝胶具有良好的溶胀性能,可促进成纤维细胞增殖和药物缓释。体外抗菌实验表明,SA/GMs/Dex-HA复合支架对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和大肠杆菌(E.coli)抑菌作用明显。通过建立大鼠全层烧伤感染模型进行体内评价,并将商品化产品海藻酸钠银敷料(Biatain~?Alginate Ag)作为阳性对照。大体实验结果表明:第21天,SA/GMs/Dex-HA治疗过的感染创面几乎全部愈合,苏木精-伊红(H&E)和Masson’s三色(Masson’s trichrome)染色分析表明SA/GMs/Dex-HA水凝胶相对于Biatain~?Alginate Ag具有更快上皮形成以及胶原形成及沉积速度。免疫组化结果显示SA/GMs/Dex-HA组的TGF-β1和TNF-α表达减少,而TGF-β3表达增加。本研究结果表明SA/GMs/Dex-HA水凝胶对耐药型MRSA具有抑菌作用,同时对疤痕形成有抑制作用,可以促进烧伤感染创面的修复。