功能化量子点适体荧光传感器构建及其在血清肿瘤标志物分析检测中的应用

来源 :长春理工大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ypengw
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
近年来,癌症的发病率和死亡率不断上升,癌症已经严重威胁人类的健康与生命。血清肿瘤标志物是临床上最理想的生物标记物之一,在肿瘤筛查、诊断、确定预后、监测治疗和检测复发等方面具有重要意义。如何更加灵敏、特异、简便、快速、精确定量和时实的检测血清肿瘤标志物,这是临床实验诊断需要解决的问题。核酸适体(Aptamer)作为体外人工筛选获得的一段寡聚核苷酸,它能够特异性结合蛋白质或其它小分子物质。然而,适体本身光电信号弱,在适体传感器构建中往往需要通过适当方法进行信号放大。量子点(QDs)是最常用的荧光探针之一,其宽激发、窄发射、以及高量子产率的特点使QDs被广泛用于荧光传感器研究领域。本文基于荧光共振能量转移(FRET)效应,构建两种QDs/WS2/Fe3O4荧光增敏型适体传感器,分别实现CA19-9单独检测和AFP、CA19-9同时检测。论文主要研究内容如下:(1)GQDs/WS2/Fe3O4荧光增强型适体传感器构建及CA19-9检测采用水热法合成了羧基化石墨烯量子点(GQDs-COOH)和二硫化钨(WS2)纳米片,为了提高GQDs-COOH荧光量子效率,在其表面修饰上聚乙二醇(PEG),共价偶联适体得到的GQDs-PEG-Apt作为CA19-9特性识别和能量供体;以载有四氧化三铁(Fe3O4)纳米颗粒与WS2纳米片形成的Fe3O4/WS2纳米复合物为能量受体,构建了荧光适体传感器。当样品中无靶标CA19-9时,能量供体与受体间FRET效应令GQDs-PEG-Apt荧光猝灭,当样品有CA19-9时,GQDs-PEG-Apt与靶标结合并脱离Fe3O4/WS2纳米复合物,体系荧光得以恢复;经磁性分离后,传感体系上清液荧光强度随CA19-9浓度增大而增强,CA19-9浓度在1.995~1000 U/m L范围内体系荧光相对恢复率与CA19-9浓度对呈良好的线性关系,检测限为0.01 U/m L。该传感器具有良好的特异性,可实现人血清肿瘤标志物CA19-9定量检测,RSD在1.09~4.51%,回收率在90.21~99.33%。(2)QDs/WS2/Fe3O4双重荧光增强型适体传感器构建及AFP和CA19-9同时检测以WS2/Fe3O4纳米复合物为单一能量受体,两种荧光发射波长相差较大的蓝色荧光量子点(GQDs-PEG)和红色荧光Cd Te量子点(RQDs)偶联的GQDs-PEG-Apt1、RQDs-Apt2分别作为AFP和CA19-9特异性识别分子和双重能量供体。由于受体与适体之间π-π堆积作用以及FRET,当受体WS2/Fe3O4纳米复合物加入到体系中时,GQDs-PEG-Apt1和RQDs-Apt2荧光同时被猝灭;当样本中存在AFP和CA19-9时,供体与受体分离,体系荧光强度得以恢复;磁分离后,体系上清液荧光强度随AFP和CA19-9浓度增加而增大。检测条件经过优化后,AFP浓度在5~1000 ng/m L、CA19-9浓度在5~1000 U/m L范围内,体系相对荧光强度与两种血清肿瘤标志物浓度具有良好线性关系,其检出限分别为0.5 pg/m L和0.396 m U/m L。该传感器具有良好的特异性,可实现人血清肿瘤标志物AFP和CA19-9同时定量检测,其中CA19-9的RSD在2.72~6.24%,回收率在95.13~100.89%,AFP的RSD在3.32~6.41%,回收率在91.92~99.28%。文中构建的QDs/WS2/Fe3O4荧光增强型适体传感器具有线性范围宽、灵敏度高、特异性强和稳定性好等特点,可用于临床实验诊断,具有临床推广应用价值。更换适配体序列,QDs/WS2/Fe3O4荧光增强型适体传感器还可用于其它靶标定量检测,这对于癌症诊断和加快实现健康中国战略方面具有重要意义。
其他文献
一次,简雍陪刘备出行,见一男一女正在路上走.简雍即刻上前对刘备说:“老大,快把那俩人抓起来吧,他们一定会行不轨之事!”刘备差点惊掉下巴:“兄弟,没发烧吧?人家前后相隔五六丈,你咋说出这样的话来?”简雍急忙答道:“老大,他们身上有作案工具哟!”rn作案工具?刘备突然间明白简雍这是话里有话!
期刊
黄龙村是重庆市大足区龙水镇的农业村.多年来,由于交通不便,村里并没有像样的产业发展起来.直到2017年,致富带头人唐均礼从外地引进爱媛38号优质柑橘,村里的产业才逐渐有了起色,农村公路等交通基础设施也同步建设起来.rn黄龙村的发展,得益于龙水镇直面困难,并提出解决措施.原来,为了发展产业,龙水镇采取“先布局产业,再布局产业路”的发展思路,即村民先发展产业,农村公路规划和建设紧跟其后.目前,仅黄龙村就已完成11公里的农村公路建设任务.
期刊
走进国道206线山东省临沂市兰山区公路驿站,清晰的路网图、整齐的各类标牌依次映入眼帘,庭院南北廊架上的壁画尤为惹人注目……在这里,南来北往的出行者不仅可以了解临沂和兰山悠久的历史、四通八达的交通,更能直观感受“水乳交融、生死与共”的沂蒙精神.
期刊
“十三五”时期,江苏省以新发展理念为导向,以“立足本地、聚焦发展、坚持开创、寻求突破”的发展模式,为提升公路网综合服务水平,加快推进公路养护管理现代化提供了强有力的支撑,打造了“安全、畅通、智慧、高效、绿色”的现代化公路网络和服务体系.
期刊
2019年底,江苏省南通市交通综合行政执法体制改革完成,在行政执法职能划出之后,市级公路养护管理机构——南通市公路事业发展中心(以下简称“市公路中心”)成为唯一法人单位和文明创建主体,原6个县级公路管理机构成为其内设机构——分中心.2021年5月27日,由市公路中心主办、通州分中心承办的“道德讲堂”顺利举办.
期刊
胸怀千秋伟业,恰是百年风华.百年来,在锦绣的潇湘大地上,一代又一代“吃得苦、霸得蛮、耐得烦”的公路人,赓续践行先辈的红色血脉,用骄人的成绩书写出跨越式发展的新篇章.rn百年来,湘路从无到有,从窄到宽,从大到强,从瓶颈制约到超前引领,从尘土飞扬的泥巴路到“畅安舒美”的沥青路……湖南公路建设突飞猛进,为服务地方经济社会发展、服务百姓便捷出行当好先行,如今,正朝着建成“交通强国”、建设现代化新湖南的伟大征程奋勇前进.
期刊
高速公路沿线施设是高速公路的重要组成部分,融入当地民族元素与风格的沿线施设,如收费站、服务用房等,为出行者提供服务的同时也提供了美的享受.云南大理至丽江高速公路、思茅至小勐养高速公路沿线设施在建设过程中,均融入了白族、纳西族、藏族元素和生态环保理念的实践.
期刊
江西省交通投资集团有限责任公司上饶管理中心(以下简称“上饶管理中心”)紧紧围绕打造路段管理一流单位的目标,积极探索员工创新工作室建设,充分发挥劳动模范、高速工匠在公路养护实践中的示范引领、骨干带头作用,成立了“啄木鸟”养护工匠室,并将其发展成为江西高速公路养护的金字招牌.rn“啄木鸟”养护工匠室是一条纽带,将江西高速公路养护工匠紧密地团结在一起,用热情、智慧、匠心浇筑梦想,铸就“啄木鸟”品牌,聚焦高品质养护管理,全力满足出行者美好出行的需求.
期刊
吉林省白山市因长白山而得名,这里历史文化底蕴深厚,生态资源禀赋独特.rn坐拥得天独厚资源rn白山市森林覆盖率高达84.1%,素有“长白山立体资源宝库”之称,同时还是世界三大矿泉水富集地之一,曾先后荣膺“中国·国际矿泉城”“中国红景天之乡”“中国松花石之乡”等桂冠.rn近年来,在“绿水青山就是金山银山”理念的指引下,白山市人文景观旅游资源得到前所未有的大开发、大建设、大提升.
期刊
本文提出了两种分布反馈半导体激光器方案用于降低混沌激光的自相关性并提高其带宽,分别为外光注入双路滤波光反馈分布反馈半导体激光器系统和外光注入光电反馈分布反馈半导体激光器系统。数值模拟和实验研究了这两个系统混沌输出的自相关性和带宽。数值模拟结果表明:在所选的参数区间范围内,这两种方案都有效抑制了混沌激光的外腔延时特征,即降低了混沌激光的自相关性;在延时特征被有效抑制的基础上,数值模拟研究这两种方案所