GmSARK::IPT融合基因的功能鉴定及大豆转化

来源 :吉林农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liongliong421
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异戊烯基转移酶(isopentenyl transferase,ipt)是Akiyoshi等从根癌农杆菌中分离的,是细胞分裂素生物合成步骤中的一个关键限速酶。衰老特异启动子SAG12与IPT基因构建载体,有效的延缓植物的生长发育和叶片的衰老在转基因大豆中(Lactuca sativaL.Eyola)。本文通过花絮侵染(Flora-Dip)法转化拟南芥,GmSARK::IPT融合基因的功能在模式植物拟南芥上得到验证;同时,利用GmSARK::IPT融合基因进行农杆菌介导的大豆子叶节遗传转化,获得特异的大豆种质资源。具体研究结果如下:1.利用花絮侵染法(Flora-Dip)将GmSARK::IPT融合基因转入拟南芥,获得28株T1代转基因植株。2.T2代转基因拟南芥进行分离比鉴定,符合孟德尔遗传定律3:1,确定为单拷贝株系。3.T3代转基因拟南芥进行表型分析,分别进行干旱,盐胁迫处理。通过统计种子的萌发率结果表明,转基因型拟南芥的发芽率明显高于野生型;统计侧根长度结果表明,干旱胁迫处理条件下,转基因型拟南芥的侧根长度高于野生型;盐胁迫条件下,转基因型与野生型无明显区别。由此证明,GmSARK::IPT融合基因具有明显抗旱性且抗盐性不明显。4.以大豆”吉育72”为材料,利用农杆菌介导的大豆子叶节遗传转化,通过GmSARK::IPT融合基因在大豆中的表达,分别获得T0代大豆12株,T1代大豆9株,T2代大豆5株,T3代大豆2株。
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