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背景:白血病是儿童时期最常见的恶性肿瘤性疾病,分类中又以急性淋巴细胞性白血病最常见,大约占75%,其发生与细胞异常增殖密切相关。Cdt1是细胞周期相关因子,是复制前复合物(Pre-replicationcomplex,Pre-RC)的重要组成成分之一,它能够保证Pre-RC在S期的前期完成其重要功能,即能够使DNA处于复制前状态,并启动DNA复制,而且确保在一个细胞周期中DNA只能复制一次,即可避免DNA的重复复制,以保证基因组的稳定性。已经有研究表明在某些癌细胞中存在Cdt1蛋白和mRNA的过度表达。本科也已有硕士研究生运用免疫组织化学及RT-PCR方法研究发现在体外培养的白血病细胞株和儿童急性淋巴细胞性白血病细胞中也存在Cdt1蛋白和mRNA的表达增高。Cdt1的过度表达可能加快细胞周期进程,并刺激细胞异常增殖,从而与肿瘤的发生、发展相关。本试验运用流式细胞仪检测比较Cdt1蛋白在儿童急性淋巴细胞性白血病细胞中治疗前后的表达水平,并与同期住院非肿瘤患者比较,探讨Cdt1与儿童急性淋巴细胞性白血病的关系,旨在加强对白血病发病机制的研究,进一步为临床诊断提供新方法,为基因靶向治疗提供新思路,为个体化治疗提供理论依据。
目的:运用流式细胞术研究儿童急性淋巴细胞性白血病细胞中细胞周期相关因子Cdt1蛋白的表达水平。
方法:以15例首次确诊的儿童急性淋巴细胞性白血病病例为实验组,以该组病例经治疗获得完全缓解后为对照组1,以同期住院非肿瘤患者10例为对照组2,采集其周围静脉全血运用溶解红细胞后间接免疫荧光标记的方法在流式细胞仪上检测淋巴细胞门内Cdt1蛋白在这三组中的表达水平。采用SPSS11.0软件进行数据分析。
结果:①比较Cdt1蛋白在急性淋巴细胞性白血病实验组与对照组2中的表达,以荧光指数FI表示,Cdt1蛋白表达水平明显增高,t值为2.085,P=0.048,统计学上有显著性差异。②实验组与对照组1比较,Cdt1蛋白表达水平明显增高,t值为6.151,P<0.001,有显著性差异。③对照组1与对照组2比较,t值为1.450,P=0.161,Cdt1蛋白表达水平无显著性差异。
结论:①儿童急性淋巴细胞性白血病细胞中细胞周期相关因子Cdt1过度表达,它可能加快细胞周期进程并刺激细胞过度增殖,参与儿童急性淋巴细胞性白血病的发生发展。②治疗缓解后Cdt1表达水平较治疗前明显下降,这进一步说明治疗前Cdt1表达增高可能与儿童急性淋巴细胞性白血病的发生有关。提示可能通过监测白血病治疗前后细胞中Cdt1表达水平,从而判断治疗疗效,为个体化治疗提供理论依据。