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目的:三阴性乳腺癌是年轻乳腺癌患者中最普遍的乳腺癌亚型,其特征是缺乏雌激素受体,孕激素受体和人表皮生长因子受体2基因。具有高度侵袭性,临床上各种治疗方案疗效均不理想。研究调控三阴性乳腺癌恶性生物学特征的相关基因将有助于揭示三阴性乳腺癌的发病机制,为开展基因治疗提供理想的治疗靶点。Micro RNA是一类小分子非编码RNA,长度约为22-25个核苷酸,它可以通过与靶基因的3’UTR区相结合导致其降解或抑制靶基因翻译。miRNA能够在细胞内调节多种肿瘤相关基因的表达,在调控细胞周期、细胞增殖、细胞分化、细胞凋亡、炎症反应及肿瘤侵袭转移等方面发挥重要作用。miR-124是迄今为止发现最早的高度保守的miRNA之一。目前许多研究指出miR-124与多种肿瘤的发生发展关系密切,而关于miR-124在三阴性乳腺癌中的功能及其机制尚未明确。ZEB2是含有两个锌指结构同源域的转录调节因子,它不仅可以抑制E-钙粘蛋白,还能够抑制参与细胞极性、细胞紧密连接、缝隙连接及桥粒的其他上皮标志物。ZEB2可以促进多种恶性肿瘤细胞的侵袭和转移,其在恶性肿瘤细胞发生上皮间质转化过程中具有十分重要的作用。本研究旨在检测miR-124在三阴性乳腺癌组织和细胞中的表达水平,在三阴性乳腺癌细胞中通过过表达miR-124来观察细胞增殖、克隆形成、侵袭能力及EMT表型的变化,进一步研究miR-124参与调控三阴性乳腺癌细胞的分子机制,为研究三阴性乳腺癌治疗新靶点提供实验依据。方法:1.三阴性乳腺癌中miR-124表达水平检测利用荧光定量PCR检测三阴性乳腺癌组织及细胞中miR-124的表达水平2.miR-124对三阴性乳腺癌细胞恶性生物学特性的影响三阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-231及BT549中过表达miR-124,利用荧光定量PCR检测转染效率。用CCK8法检测miR-124对三阴性乳腺癌细胞增殖能力的影响;应用平板克隆实验观察miR-124对三阴性乳腺癌细胞克隆形成能力的影响;运用Transwell侵袭实验来观察过表达miR-124对三阴性乳腺癌细胞侵袭能力的影响。3.miR-124对三阴性乳腺癌细胞侵袭能力影响的分子机制研究生物信息学软件预测ZEB2可能为miR-124的直接靶基因;双荧光素酶报告基因实验验证miR-124可以通过与ZEB2 3’UTR区相结合;荧光定量PCR和Western blot验证过表达miR-124对ZEB2基因表达的影响;利用实时荧光定量PCR和Western blot检测E-cadherin、N-cadherin及Vimentin mRNA及蛋白质的表达。Transwell小室侵袭实验检测miR-124通过靶向作用于ZEB2抑制三阴性乳腺癌细胞的侵袭。结果:在三阴性乳腺癌组织及细胞中miR-124的表达下调,过表达miR-124能够抑制三阴性乳腺癌细胞增殖、克隆形成及侵袭能力。生物信息学分析表明ZEB2的3’UTR区含有miR-124直接作用的靶序列,双荧光素酶报告基因分析进一步验证miR-124能与ZEB2的3’UTR区相结合;过表达miR-124能够抑制ZEB2的表达;过表达miR-124能够抑制三阴性乳腺癌细胞上皮间质转化;过表达ZEB2能够逆转miR-124对三阴性乳腺癌细胞侵袭能力的抑制作用。结论:miR-124在三阴性乳腺癌组织和细胞中表达降低;miR-124抑制三阴性乳腺癌细胞增殖、克隆形成及侵袭能力;miR-124通过靶向作用于ZEB2影响上皮间质转化抑制三阴性乳腺癌细胞侵袭能力。