【摘 要】
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目的检测女性盆腔器官膨出(pelvic organ prolapse,pop)患者子宫主韧带和阴道前壁中弹性蛋白(elastin)、弹性蛋白酶抑制剂(elafin)的表达,探讨两种蛋白表达变化与POP发生发展
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目的检测女性盆腔器官膨出(pelvic organ prolapse,pop)患者子宫主韧带和阴道前壁中弹性蛋白(elastin)、弹性蛋白酶抑制剂(elafin)的表达,探讨两种蛋白表达变化与POP发生发展的关系。材料与方法一、材料51例子宫脱垂患者的主韧带、膨出阴道前壁全层组织及20例非脱垂患者的主韧带及阴道前壁全层组织来自2007年10月到2009年10月间中国医科大学附属盛京医院妇科手术切除的组织。所有组织均经福尔马林固定,常规石蜡包埋。二、主要试剂elafin鼠抗人单克隆抗体及弹性蛋白兔抗人多克隆抗体购自美国Santa公司,二氨基联苯胺(DAB)显色剂及S-P试剂盒购白北京中杉生物技术有限公司。三、方法免疫组织化学染色按链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶(S-P)法行免疫组织化学染色。切片常规脱蜡至水,高温高压进行抗原修复,一抗4℃孵育过夜,DAB显色,苏木素复染。用PBS代替一抗作为阴性对照。结果判定:细胞外基质内见棕黄色颗粒为阳性表达。光镜下在每张切片中随机选取10个高倍视野,评分标准:0,无阳性区域;1,阳性区域面积1-20%;2,阳性区域面积20-50%;3,阳性区域面积>50%。0-1:为弹性蛋白或elafin阴性表达;2-3:弹性蛋白或elafin阳性表达。四、统计学分析应用SPSS13.0统计分析软件,弹性蛋白或elafin的蛋白表达和POP临床病理特征的关系用卡方检验,弹性蛋白或elafin的蛋白表达关系用Spearman目关分析;P<0.05为有统计学意义。结果一、elafin蛋白阳性表达于细胞外基质,在POP组患者阴道前壁及子宫主韧带组织elafin阳性表达水平分别为67%、63%。而在对照组阳性表达水平分别为30%、20%。二者有显著性差异(P=0.005、0.001)。统计学分析表明,伴有压力性尿失禁者(P=0.003、0.001)和脱垂程度较重者(ⅡvsⅢ、Ⅳ,P=0.028、0.014)子宫主韧带及阴道前壁组织中elafin阳性表达率明显增高。而elafm蛋白表达与患者绝经状态(P=0.212、0.353)及阴道分娩次数(P=1.000、0.164)无关。二、弹性蛋白亦表达于细胞外基质,弹性蛋白在POP组阴道壁、主韧带表达水平明显低于对照组(P=0.004、0.001),其表达水平与患者POP-Q分度密切相关(ⅡvsⅢ、Ⅳ,P=0.005、0.012),而与患者是否伴有压力性尿失禁(P=0.489、0.123),阴道分娩次数(P=0.301、0.149)及患者绝经状态(P=0.841、0.696)无关。三、POP组患者阴道前壁elafin与弹性蛋白共表达阳性者为12例,elafin与弹性蛋白均阴性者为10例。经Spearman相关性分析,elafin与弹性蛋白表达无明显相关(P=0.689),在子宫主韧带组织亦无统计学意义(P=0.105)。结论一、POP患者盆底结缔组织中弹性蛋白的表达与POP的发生、发展有关。二、elafin表达可能是导致POP发生的原因之一。
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