【摘 要】
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目的构建携带白介素-18(IL-18)基因的人脐带间充质干细胞(hUMSCs),为肿瘤的靶向性基因治疗研究提供一种手段。方法体外分离培养hUMSCs,流式细胞仪(FACS)检测hUMSCs的细胞免疫
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目的构建携带白介素-18(IL-18)基因的人脐带间充质干细胞(hUMSCs),为肿瘤的靶向性基因治疗研究提供一种手段。方法体外分离培养hUMSCs,流式细胞仪(FACS)检测hUMSCs的细胞免疫表型CD29、CD44、CD105、CD34和CD45。应用基因重组技术将表达IL-18基因的慢病毒和空白慢病毒转染至hUMSCs.实验共设3个组：实验组转染慢病毒(IL-18-hUMSCs),对照组转染空白慢病毒(NC-hUMSCs),空白对照组未进行转染(hUMSCs)。利用RT-PCR及Western法检测各组IL-18的mRNA及蛋白表达水平。结果成功在体外分离和培养了hUMSCs,流式细胞仪检测结果显示hUMSCs表达CD29、CD44和CD105,而不表达CD34和CD45,符合hUMSCs的表型。成功构建了携带IL-18基因的hUMSCs, RT-PCR及Western法检测结果提示实验组IL-18的mRNA及蛋白相对表达量明显高于其他组(P均<0.05),成功将IL-18基因转染至hUMSCs并能稳定表达。结论成功构建了携带IL-18基因的hUMSCs并能稳定表达IL-18,为肿瘤靶向性基因治疗实验性研究提供了一种新实验手段。
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