糖皮质激素调节人卵巢癌细胞系HO-8910增殖、形态改变和粘附作用的分子机制

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糖皮质激素(glucocorticoids, GCs)在调节多种组织来源的细胞的生长、分化和粘附中发挥了重要的作用,迄今的研究已证明GCs的作用主要是通过其受体介导调节靶基因的转录而发挥生物学效应的。因此,只有了解GCs通过哪些靶基因介导它对细胞增殖、分化、凋亡和粘附等的调节作用,才能真正阐明GCs在这方面的作用机制。 我们前期的研究表明Dex能够抑制人卵巢癌HO-8910细胞的生长,并使细胞形态从上皮样转变为成纤维细胞样。另外,我们在实验中发现Dex处理HO-8910 24 h以上可以使细胞在0.25%胰酶作用下的脱落时间比对照延长了约4~5倍。这个现象提示Dex增强了细胞与细胞外基质(extracellular matrix, ECM)间的粘附能力。本课题则进一步研究Dex调节人卵巢癌细胞HO-8910增殖、形态改变和粘附能力的可能机制。 在本课题的第一部分,我们研究了Dex对小G蛋白RhoB信号的调节作用及其可能的生物学意义。小G蛋白Rho亚族是一类GTP酶结合蛋白,它通过其下游效应蛋白介导参与调控细胞的骨架重组、生长、凋亡、运动等。RhoB作为Rho亚族的成员之一,能抑制某些肿瘤细胞增殖并诱导其凋亡。因此我们在观察Dex对人卵巢癌HO-8910细胞RhoB表达的影响的基础上,进一步研究了Dex诱导RhoB表达是否与Dex抑制细胞增殖和诱导其形态改变有关。由于卵巢癌细胞在一定程度上保留了正常卵巢上皮细胞的特性,因此,探讨Dex是通过哪些/个靶基因介导来调节HO-8910细胞增殖和形态改变将有助于我们了解GCs抑制卵巢上皮细胞转化的可能机制。 我们首先用RT-PCR和Western Blot方法检测HO-8910细胞小G蛋白的表达,结果发现,Dex对RhoA和RhoC的mRNA水平无明显的调节作用,却能以时间和浓度依赖性方式上调RhoB mRNA和蛋白的表达。另外,我们在其他多株肿瘤细胞系中也同样观察到这一现象。而且,RU486(GR的拮抗剂)几乎可以完全阻断Dex对RhoB mRNA和蛋白的诱导作用。这部分结果表明,Dex能够通过GR受体介导诱导RhoB mRNA和
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