论文部分内容阅读
目的:研究香烟烟雾与慢性应激联合作用对大鼠学习记忆能力及生殖功能的影响。方法:健康SD大鼠40只,雌雄各半,随机分为对照组、香烟烟雾组、慢性应激组、联合染毒组,每组10只。对照组不采取任何处理;香烟烟雾组大鼠进行呼吸道静式染毒,每次10支香烟,每天1次,每次30分钟;慢性应激组从5种慢性应激方案中每日随机给予一种慢性应激,每种慢性应激方式不连续应用;联合染毒组每日在香烟烟雾染毒(处理同香烟烟雾组)基础上进行慢性应激处理(处理同慢性应激组);实验持续12周。大鼠在染毒2、4、8、10、12周时进行Morris水迷宫测试,评估大鼠学习记忆能力;12周后,处死大鼠,计算脑、卵巢、睾丸脏器系数;测定血清Cort浓度、Ach、ChAT、FSH、GnRH、IGF-1、LH、E2含量及AchE活力。观察大鼠脑、卵巢、睾丸组织病理学变化;通过免疫组织化学染色法、RT-PCR以及Western blot等方法分别检测脑、卵巢、睾丸组织中PI3K/AKT信号通路上关键的mRNA和蛋白表达情况。结果:1.与对照组比较,慢性应激组血清Cort含量升高(P<0.05);2.实验第2周,与慢性应激组比较,联合染毒组逃避潜伏期缩短(P<0.05);实验第10周,与对照组比较,各染毒组大鼠逃避潜伏期增加(P<0.05);与对照组比较,各染毒组大鼠血清Ach含量下降(P<0.05),慢性应激组大鼠血清ChAT含量下降、AchE活力升高(P<0.05);HE染色结果显示,各染毒组大鼠脑组织均出现神经元核固缩,脑膜血管充血及淤血;与对照组比较,香烟烟雾、慢性应激及联合染毒均造成脑组织中PTEN基因mRNA表达上调,PI3K、AKT、mTOR阳性面积率、mRNA表达及蛋白含量下降(P<0.05);3.与对照组比较,慢性应激及联合染毒组大鼠卵巢脏器系数降低(P<0.05);与对照组比较,香烟烟雾组血清GnRH、IGF-1、LH、E2含量降低(P<0.05),慢性应激组血清FSH、IGF-1、LH、E2含量降低(P<0.05),联合染毒组大鼠血清FSH、IGF-1、LH含量降低(P<0.05);与对照组比较,香烟烟雾、慢性应激及联合染毒均会引起大鼠卵巢及睾丸组织不同程度淤血,代偿性增生,造成卵母细胞核萎缩,睾丸组织中生殖细胞核固缩;与对照组比较,香烟烟雾、慢性应激及联合染毒均可导致大鼠卵巢及睾丸组织中PI3K、AKT、mTOR阳性面积率、mRNA表达及蛋白含量下降(P<0.05)。结论:1.香烟烟雾、慢性应激单独及联合染毒均可致大鼠的学习记忆能力降低。2.香烟烟雾、慢性应激单独及联合染毒会引起大鼠的生殖功能损伤。