【摘 要】
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生物标志物能够客观表征生命体不同生理过程,其检测对于疾病诊断和预防具有非常重要的作用。虽然目前对于生物标记物的检测已经比较成熟和高效,但是在很多情况下其于临床诊断的应用仍然缺乏准确性、敏感性和特异性。在本研究中我们通过构建多种功能化纳米材料的生物传感实现对疾病生物标记物的快速、高通量检测。我们的研究工作主要分为下面三个部分。(1)利用多壁碳纳米管的导电性和易修饰性构建了一种基于ITO的电化学传感器
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生物标志物能够客观表征生命体不同生理过程,其检测对于疾病诊断和预防具有非常重要的作用。虽然目前对于生物标记物的检测已经比较成熟和高效,但是在很多情况下其于临床诊断的应用仍然缺乏准确性、敏感性和特异性。在本研究中我们通过构建多种功能化纳米材料的生物传感实现对疾病生物标记物的快速、高通量检测。我们的研究工作主要分为下面三个部分。(1)利用多壁碳纳米管的导电性和易修饰性构建了一种基于ITO的电化学传感器(ITO/Chi/MWCNTs-Tf/BSA),并将其用于转铁蛋白受体的检测。该方法便捷、快速、成本低,在检测中表现出了高特异性和电化学响应,同时其检测限为0.106 ng/m L,远远低于传统的ELISA方法(75.7 ng/m L),从而实现对转铁蛋白受体快速、准确的检测。(2)基于金铂纳米粒子修饰e ITO传感器,用于生物标记物电化学检测和荧光增强双重检测。当Au:Pt=1:0时,将其用于100 ng/m L到104 ng/m L不同浓度的Tf R检测时的电化学响应范围为1.02×10-6A~1.98×10-6 A,得到标准曲线为I=-2.41×10-7log[CTf R]+1.99×10-6,相关系数R2=0.9982,展示出了良好的性能;同时,将其应用于荧光增强时,单位面积荧光强度大约为62±2,相比于未修饰的ITO导电玻璃具有明显的增强效果。双平台的设计有助于提升生物标记物检测准确度。(3)将激光捕获显微切割技术(LCM)同基质辅助激光解吸电离质谱(MALDI MS)结合起来用于宫颈癌单细胞代谢组学的检测。使用PCA和OPLS-DA模型对质谱结果进行统计分析,结果发现两组差异具有显著性(OPLS-DA:Q2=0.647,R2=0.771),并且其AUC为0.8008。同时,我们基于S-plot图和VIP值筛选出了10个潜在生物标记物。我们为探究宫颈癌发病分子生物学机理和宫颈癌的早期筛查提供了非常重要的技术平台。
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