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目的血管内皮生长因子(Vascular Endothelial Growth Factor，VEGF)家族是一类多功能的细胞因子，在血管生成和淋巴管生成中具有直接和间接的调控作用，可促进内皮细胞增殖、促进血管生成以及增加血管的通透性。血管内皮生长因子在女性生殖方面贯穿从受精到胎儿分娩全过程，在滋养细胞增殖与侵入及胎盘的发生发展过程中有重要作用。在妊娠早期，胎儿一胎盘的生长发育主要取决于细胞滋养细胞(Ctotrophoblast，CTB)分化和子宫胎盘血管网络的构建。CTB存在两条截然不同的分化途径，一方面可分化形成合体滋养细胞(Syncytrophoblast，STB)，执行妊娠分泌功能；另一方面分化形成侵润型滋养细胞(Invasive Cytotrophoblast)，向母体侵润，分化并替代血管内皮细胞，降解血管平滑肌及弹力纤维，以至血管腔扩大，血流阻力下降，血流量增加，形成高排低阻血管，进行母胎界面的血管重铸。这种血管“重铸”是由细胞滋养细胞逐渐分化为类血管内皮细胞并替代螺旋小动脉血管内皮细胞而完成的。细胞滋养细胞分化和(或)替代不良导致的植入期血管“重铸”障碍是妊娠失败和某些疾病的发生机制。激活素是TGF-β家族中的一员，由于在垂体前叶可刺激FSH的的释放的功能而被分离纯化出来并被命名。近年来的有关激活素的研究表明，激活素在多种生物系统中发挥重要的作用，尤其是在细胞增殖分化、凋亡和癌变中的功能备受关注。激活素由β亚基构型的不同而分为三型，即激活素A、激活素B和激活素AB。激活素在人体组织中分布广泛，其中胎盘中只有激活素A表达。近年来的研究表明激活素A可通过调节VEGF的表达而参与血管生成。Maeshima K等报道激活素A诱导体外培养的牛动脉血管内皮细胞(Bovine Aortic Endothelial Cells，BAEC)形成血管，在此过程中有明显的VEGF及其受体的表达升高，应用激活素A的拮抗剂卵泡休止素可阻抑血管生成，得出激活素A可调节VEGF的表达进而诱导BAEC形成血管的结论。有关激活素A是否可调节人细胞滋养细胞分泌VEGF国内外尚无人报道。本实验通过建立人细胞滋养细胞无血清培养方法，探讨激活素A在人细胞滋养细胞中对VEGF分泌是否具有调节作用。若此项研究成功，一方面可以从胚胎植入发生机制入手，为“有效”的妊娠提供备选分子，以期应用于试管婴儿等辅助生殖技术中；另一方面，由于某些疾病患者胎盘中存在着激活素A和VEGF的异常表达，可应用此机制深入探讨疾病病因，并提供早期诊断筛查指标，如妊娠期高血压疾病等。方法本研究以正常妊娠6-8周的绒毛组织为材料，用无血清培养方法体外培养人细胞滋养细胞。免疫细胞化学确认人细胞滋养细胞中VEGF及其相应受体FLT-1，KDR-2的表达。RT-PCR检测激活素A作用前后人细胞滋养细胞的VEGF，FLT-1及KDR-2的mRNA表达。结里无血清培养细胞滋养细胞有VEGF及其受体FLT-1和KDR-2的表达。VEGF表达部位主要集中在细胞膜，其次在细胞质中；而FLT-1表达部位主要集中在细胞膜上；KDR-2表达于细胞质中。RT-PCR结果显示激活素A可显著上调VEGF，FLT-1和KDR-2的mRNA水平表达，并存在剂量依赖关系。结论无血清培养的细胞滋养细胞有VEGF及其受体FLT-1和KDR-2的表达。激活素A刺激可显著上调VEGF，FLT-1和KDR-2的mRNA水平表达，为进一步研究激活素A对VEGF在蛋白质水平上调节打下了实验基础。从胚胎植入发生机制入手，为“有效”的妊娠提供备选分子而应用于辅助生殖研究中，提高成功率。同时为探讨某些疾病病因或寻找某些疾病早期诊断筛查指标，如妊娠期高血压疾病等提供理论和实践基础，补充了激活素A在妊娠期高血压疾病中的作用。