氨基甙类抗生素（aminoglycoside，AmAn）的耳毒性已经成为该类药用于 人类的一个主要问题，尽管如此，由于其性质稳定、抗菌谱广、抗菌杀菌力强、 使用方法简便、价格便宜等优点，特别是近年来随着结核病的又一次暴发，AmAn 的临床应用更为广泛：为此，如何预防其毒副作用的发生势在必行，在过去的 50年里，对预防AmAn耳中毒进行了大量的研究工作，无数次的药物在一次 或数次动物实验中，显示减轻了耳毒性，其中包括维生素A、B、C、K，各种 各样的氨基酸，激素，自由基清除剂，巯氢基复合物等，这些化学物质从化学 结构和药物学特性来看，并没有共同特性，从而造成耳毒性的发病机理复杂化， 曾进行过多种推断，其中包括氨基甙类药物在内耳淋巴液中的蓄积作用，细胞 摄取，对RNA、DNA、蛋白质、脂质、前列腺素合成的影响以及离子转运，能 量代谢等，其中一个主要因素认为是：AmAn与浆膜阴离子，尤其是磷脂结合， 使溶酶体磷脂酶活性被抑制，引起磷脂沉积病态而致中毒发生；近来提出多聚 天门冬氨酸（polyaspartic acid，PAA）具有拮抗 AmAn肾毒性与耳毒性作用， 从AmAn中毒的源头阻止其毒性发生，从而防止了AmAn引起的溶酶体磷脂沉 积病态的发生，干涉了AmAn抑制肌醇脂质第二信使系统、促使线粒体自由基 的产生等一系列病理改变的发生；本研究试图从以下三方面进行研究。 第一部分 多聚天门冬氨酸对庆大霉素干扰耳蜗磷脂代谢的影响 目的：观察PAA对庆大霉素哈（gentamicin，GM）干扰耳蜗组织磷脂代谢的 影响，进一步探讨PAA对GM耳毒性拮抗作用机制。方法：采用高效液相色谱 分析法（high performance liquidchromatography，HPLC）测定不同给药组：Ⅰ组 －单用GM、Ⅱ组－PAA＋GM、Ⅲ组－单用PAA、Ⅳ组－单用生理盐水；在体给药1、 5、10天后，豚鼠耳蜗组织各类磷脂的含量；同时，在给药前、后记录 ABR， eM 回 博士学位论文 多聚天门冬氢酸对庆大霉素耳毒性桔抗机制的实验研究—中文摘要 用透射电镜观察不同给药组、不同给药时间后豚鼠耳蜗C。ti七器毛细胞溶酶体 形态改变。结果：①给药1天后四组间耳蜗组织各类磷脂含量、ABR阈值差 异均无显著性o功刀5）洱蜗 COrn七器毛细胞溶酶体形态无明显改变。②给药 5 天后耳蜗组织磷酸肌醇…hosphatidylinositol，PI厂 一磷酸肌醇 （PhosPhatdyllnositol PhosPhate，PD）含量四组间差异有显著性（P＜0．01），e 其他磷脂含量四组间差异无显著性（＊＞0刀5）；AB R阈值I组有增高趋势 …列．05）；超微结构二组耳蜗COrn七器毛细胞表皮板下可见较多溶酶体聚集， 体积略增大，并可见HensenS体形成，而其他3组毛细胞未见此改变。③给药 10天后耳蜗组织只有＊ 含量四组间差异有显著性①＜0刀1），其他各类磷脂含 量均差异无显著性四＞0刀5卜ABR阈值1组明显增高…＜oOI人 超微结构1组 耳蜗C。ti七器毛细胞改变与给药5天相似，但较其严重，可见大量溶酶体聚集， 体积明显增大，其他3组未见此改变。结论：PAA对GM干扰耳蜗组织磷脂代 谢有抑制作用，从而桔抗了GM所致溶酶体磷脂沉积病态及耳蜗毒性的发生。 第二部分 多聚天门冬氨酸对庆大霉素抑制耳蜗肌醇脂质信使 系统的影晌 目的：观察PAA对GM抑制耳蜗肌醇脂质信使系统的影响，进一步探讨PAA 对 GM耳毒性桔抗作用机制。方法：采用［＊－肌醇参入法和 HPLC测定不同给 药组不同给药时间（同第一部分）豚鼠耳蜗组织肌醇磷酸酯（inositol phosphates，ps）的放射活性、多磷酸肌醇磷月polyphosphatidylinositol，PPI）含 量及磷脂酶C（PhosPholiPase C，PLC）的活性。结果：①给药1天后四组间耳蜗 组织 WS放射活性、PPI含量及 PLC酶活力均无明显改变中＞0刀5人②给药 5 天后单用GM组耳蜗组织PPI含量增加，IPS放射活性减低，PLC酶活力减低； 而PAA＋GM组IPS放射活性、PPI含量及PLC酶活力，与对照组相比差异无显 著性（P＞0．05）。③给药 10天后耳蜗组织单用 GM组 PPI含量增加，但与单用 3 博士学位论文 多聚天门冬氨酸对庆大