FOXO1调控外阴鳞癌细胞系A431自噬行为的研究

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目的:探讨验证FOXO1的过表达与外阴鳞癌细胞的自噬生物学行为的相关性从而为外阴癌发生发展等相关机制的研究提供一定的分子生物学依据。研究方法:根据GeneBank中人FOXO1 CDS序列由上海吉凯基因设计并合成构建GV144-FOXO1真核表达质粒及GV144空质粒并进行分析鉴定,构建后的质粒瞬时转染外阴鳞癌细胞系A431,测FOXO1过表达质粒瞬时转染后的样本,通过荧光显微镜观察外阴鳞癌细胞系A431内有无绿色荧光显现来了解GV144-FOXO1质粒及GV144空质粒转入细胞的情况,转染后外阴鳞癌细胞系A431中FOXO1、LC3A、LC3B的蛋白表达情况通过免疫印迹法(western blot)检测。结果:向外阴鳞癌细胞系A431转染GV144-FOXO1过表达质粒及GV144阴性对照质粒后,在荧光显微镜下观察转染GV144-FOXO1过表达质粒及GV144阴性对照质粒后的外阴鳞癌细胞系A431中有绿色荧光显现,说明质粒已转入细胞。Western blot实验中,GV144-FOXO1过表达质粒转染组的FOXO1蛋白表达明显比GV144阴性对照质粒组高,并且差异有统计学意义(P<0.05),转染GV144阴性质粒组及空白组的FOXO1的蛋白表达量无明显差异(P>0.05);GV144-FOXO1过表达质粒转染组的LC3B蛋白表达较GV144阴性对照质粒明显增高,LC3A/B降低。结论:在外阴鳞癌细胞系A431中过表达FOXO1能够增强细胞自噬活性。
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